| 采用定点整合表达技术构建t-PA表达CHO工程细胞株 |
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| 引用本文： | 吴本传,陈昭烈,刘红,郝振明,刘兴茂,黄培堂.采用定点整合表达技术构建t-PA表达CHO工程细胞株[J].药物生物技术,2004,11(4):221-224. |
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| 作者姓名： | 吴本传 陈昭烈 刘红 郝振明 刘兴茂 黄培堂 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究与发展计划项目资助 (No .2 0 0 1AA2 15 461) |
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| 摘 要： | 运用Flp InTM 定点整合表达系统构建表达组织型纤溶酶原激活剂 (tissue type plasminogenactivator ,t PA)的CHO工程细胞株。将pcDNA5 /FRT载体和携带t PA基因的 pJOD S载体用Hind/KpnI双酶切 ,再将回收的 2 .0kbt PAcDNA片段和pcDNA5 /FRT载体连接 ,构建 pcDNA5 /FRT/t PA质粒 ;应用Flp InTM定点整合表达系统 ,将t PAcDNA定点插入Flp lnTM CHO细胞基因组中的 1个单拷贝位点上 ,以潮霉素B筛选定点整合t PAcDNA的细胞克隆。经筛选和体外纤维蛋白溶解活性检测 ,获得了t PA表达水平为 15 0 0～ 2 0 0 0IU/ (10 6cells·day)的CHO工程细胞株。
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| 关 键 词： | 定点整合 t-PA 表达 中国仓鼠卵巢细胞 |
| 文章编号： | 1005-8915(2004)04-0221-04 |
Development of Recombinant CHO Cell Line Expressing t-PA Via Site-Specific Integration Expression System |
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| WU Ben-chuan,CHEN Zhao-lie,LIU Hong,HAO Zhen-ming,LIU Xing-ma o,HUANG Pei-tang.Development of Recombinant CHO Cell Line Expressing t-PA Via Site-Specific Integration Expression System[J].Pharmaceutical Biotechnology,2004,11(4):221-224. |
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| Authors: | WU Ben-chuan CHEN Zhao-lie LIU Hong HAO Zhen-ming LIU Xing-ma o HUANG Pei-tang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Site specific integration t-PA Expression CHO cel ls |
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