| pEGFP-C2-MeCP2重组质粒的构建和表达 |
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| 引用本文： | 彭云云,黄成,马陶陶,徐涛,李琳,陈晨,李俊.pEGFP-C2-MeCP2重组质粒的构建和表达[J].安徽医科大学学报,2014,0(9):1193-1197. |
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| 作者姓名： | 彭云云 黄成 马陶陶 徐涛 李琳 陈晨 李俊 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学药学院;安徽医科大学肝病研究所，合肥 230032;安徽医科大学药学院;安徽医科大学肝病研究所，合肥 230032;安徽医科大学药学院;安徽医科大学肝病研究所，合肥 230032;安徽医科大学药学院;安徽医科大学肝病研究所，合肥 230032;安徽医科大学药学院;安徽医科大学肝病研究所，合肥 230032;安徽医科大学药学院;安徽医科大学肝病研究所，合肥 230032;安徽医科大学药学院;安徽医科大学肝病研究所，合肥 230032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，新教师博士点基金 |
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| 摘 要： | 目的构建人类甲基化CpG结合蛋白( MeCP2)基因的真核表达载体pEGFP-C2-MeCP2,在非洲绿猴肾成纤维细胞(COS-7)中检测其表达及定位。方法从人肝癌细胞(HepG2)中获得cDNA,以其为模板扩增MeCP2全长编码基因,克隆到载体 pEGFP-C2上。构建的重组质粒测序后转染至COS-7细胞中,荧光倒置显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,检测MeCP2蛋白定位,Western blot法和RT-PCR法鉴定MeCP2蛋白和基因表达。结果成功构建 pEGFP-C2-MeCP2重组质粒,酶切鉴定片段为1461 bp。 MeCP2蛋白及基因表达水平明显增加。细胞定位实验结果显示MeCP2蛋白定位于胞核。结论成功构建重组质粒 pEGFP-C2-MeCP2,该质粒的构建为进行MeCP2功能研究提供了依据。
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| 关 键 词： | MeCP2 COS-7 基因表达 |
Construction of recombinant pEGFP-C2-MeCP2 and its expression |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | MeCP2 COS-7 gene expression |
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