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脊髓缝隙连接蛋白-30在大鼠吗啡耐受形成中的作用
引用本文:谢滔,刘清珍,王芬,江姿璐,李伟彦.脊髓缝隙连接蛋白-30在大鼠吗啡耐受形成中的作用[J].临床麻醉学杂志,2015,31(6).
作者姓名:谢滔  刘清珍  王芬  江姿璐  李伟彦
作者单位:1. 第二军医大学南京临床医学院 南京军区南京总医院麻醉科, 上海市,200433
2. 南京军区南京总医院麻醉科
摘    要:目的 观察鞘内注射针对脊髓缝隙连接蛋白-30(CX30)的小干扰RNA(siRNA)对大鼠吗啡耐受形成的影响及其相关的分子机制.方法 雄性SD大鼠48只,随机分为空白对照组(Ⅰ组)、吗啡耐受组(Ⅱ组)、错配siRNA对照组(Ⅲ组)、CX30 siRNA处理组(Ⅳ组),所有大鼠鞘内置管,手术后确定导管位置并记为第0天.第1天上午测定大鼠热刺激缩足反应基础潜伏期(PWTL)(P1)及背部皮下注射吗啡5 mg/kg后30 min的PWTL(P2),计算30 min的最大可能镇痛效应比值MPE.第2~8天上午8:30,Ⅰ、Ⅱ组鞘内注射DPEC溶剂15μl,Ⅲ组鞘内注射错配siRNA 15μl,Ⅳ组鞘内注射CX30 siRNA 15μl;9:00及17:00Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各组背部皮下注射吗啡10 mg/kg,Ⅰ组注射等量生理盐水.第9天行为学测试计算MPE,方法同第1天.随后处死大鼠取腰段脊髓采用West-ern blot检测CX30、ERK及p-ERK蛋白的表达,免疫荧光分析星型胶质细胞标记物GFAP的表达.结果 第9天,与Ⅰ组比较,其余各组P2及MPE值明显降低(P<0.05);与Ⅱ组比较,Ⅳ组P2及MPE值明显升高(P<0.05).与Ⅰ组比较,其余各组p-ERK及CX30表达明显升高(P<0.05);与Ⅱ组比较,Ⅳ组p-ERK及CX30表达明显降低(P<0.05).与Ⅰ组比较,其余各组GFAP的表达明显增多(P<0.05),其中Ⅱ组与Ⅲ组GFAP表达最多;与Ⅱ组比较,Ⅳ组GFAP表达明显降低(P<0.05).结论 鞘内注射CX30 siRNA可以部分缓解大鼠吗啡耐受的形成,其机制可能与抑制脊髓CX30的表达,ERK磷酸化的下调,减少星型胶质细胞的活化有关.

关 键 词:吗啡耐受  星型胶质细胞  缝隙连接蛋白  CX30  小干扰RNA

The role of spinal cord CX30 in the development of morphine-induced tolerance in rats
XIE Tao,LIU Qingzhen,WANG Fen,JIANG Zilu,LI Weiyan.The role of spinal cord CX30 in the development of morphine-induced tolerance in rats[J].The Journal of Clinical Anesthesiology,2015,31(6).
Authors:XIE Tao  LIU Qingzhen  WANG Fen  JIANG Zilu  LI Weiyan
Abstract:
Keywords:Morphine tolerance  Astrocyte  Connexin  CX30  siRNA
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