| 人β2微球蛋白基因启动子的克隆及其在P815细胞中的活性研究 |
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| 引用本文： | 张兴黔,梅文瀚,钱关祥.人β2微球蛋白基因启动子的克隆及其在P815细胞中的活性研究[J].细胞与分子免疫学杂志,2005,21(6):672-675. |
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| 作者姓名： | 张兴黔 梅文瀚 钱关祥 |
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| 作者单位： | 上海第二医科大学生物化学教研室及分子生物学实验室,人类基因治疗研究中心,上海,200025 |
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| 基金项目： | 上海市科委科技攻关项目资助(No.03DZ19235) |
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| 摘 要： | 目的:克隆人β2微球蛋白(β2m)基因启动子,并研究其在小鼠肥大细胞瘤细胞P815中对下游报告基因的启动活性。方法:用PCR法从基因组内扩增β2m基因启动子。通过基因重组的方法,构建含此启动子的EGFP基因真核表达载体,然后分别瞬时和稳定转染P815细胞。通过RT-PCR、荧光显微镜摄像和流式细胞术分析,观察IFN-γ作用前后EGFP的表达。结果:从基因组内扩增出302bp的人β2m基因的启动子,成功地构建了含此启动子的真核报告载体。RT-PCR的结果表明,IFN-γ对启动子的活性具有诱导作用,且呈浓度依赖性。流式细胞术的结果显示,在5×105U/LIFN-γ作用下,尽管表达EGFP的细胞数量没有差异,但刺激组EGFP的表达强度是未刺激组的2倍。结论:人β2m基因启动子在小鼠肥大细胞瘤细胞P815中具有高度的启动活性。通过该启动子中所含干扰素刺激反应元件(ISRE),可在IFN-γ诱导作用下调控下游目的基因的表达。
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| 关 键 词： | β2微球蛋白 启动子 IFN-γ |
| 文章编号： | 1007-8738（2005）06-0672-04 |
| 收稿时间： | 2004-11-23 |
| 修稿时间： | 2005-01-24 |
Activity analysis of human β2-microglobulin gene promoter in P815 cells |
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| ZHANG Xing-qian,ZHANG Xing-qian,QIAN Guan-xiang.Activity analysis of human β2-microglobulin gene promoter in P815 cells[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2005,21(6):672-675. |
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| Authors: | ZHANG Xing-qian ZHANG Xing-qian QIAN Guan-xiang |
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