16SrRNA实时荧光定量PCR检测肠道菌群的研究

目的：应用细菌的16SrRNA序列设计双歧杆菌（Bifidobacterium）、乳酸杆菌（Lactobacillus）、大肠杆菌（E.coli）、肠球菌（Enterococcus）的引物并对肠道的这4种细菌菌属进行定量测定,绕过分离培养环节,以微生物rRNA/rDNA基因作为种属鉴别序列,确定肠道菌群的情况。方法：采用腹腔注射链脲菌素（STZ）的方法建立小鼠糖尿病模型,分别检测小鼠肠道主要的菌群。结果：造模成功小鼠血糖升高（〉12.3mmol/L,P〈0.05）时,肠道益生菌（双歧杆菌,乳酸杆菌）数量降低（P〈0.05）,而大肠杆菌、肠球菌数量增加（P〈0.05）。结论：小鼠糖尿病模型可引起肠道菌群失调,荧光定量PCR是一种特异性高、敏感性强的定量方法,可正确定量肠道中的细菌菌群数量。