人参皂苷Rg1通过长链非编码RNA-Malat1/微小RNA-124-3p/层粘连蛋白γ1信号轴上调星形胶质细胞相关功能蛋白表达促进脊髓损伤修复题录 |
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引用本文: | 贲兴磊,申科律,吴端荣,郭维潇,马宇航,陆政峰.人参皂苷Rg1通过长链非编码RNA-Malat1/微小RNA-124-3p/层粘连蛋白γ1信号轴上调星形胶质细胞相关功能蛋白表达促进脊髓损伤修复题录[J].中华实验外科杂志,2022(11). |
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作者姓名: | 贲兴磊 申科律 吴端荣 郭维潇 马宇航 陆政峰 |
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作者单位: | 1. 苏州大学附属第二医院骨科;2. 上海交通大学医学院苏州九龙医院骨科 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(82074173、81971164);;江苏省中医药局科技项目(YB201956); |
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摘 要: | 目的验证人参皂苷Rg1通过长链非编码RNA(lncR)-Malat1/微小RNA(miR)-124-3p/层粘连蛋白γ1(Lamc1)信号轴调控星形胶质细胞(AS)促进脊髓损伤修复。方法原代AS来源于新生大鼠的脑组织(补充组织来源)。使用免疫荧光染色鉴定细胞纯度。通过细胞转染分别改变lncR-Malat1和miR-124-3p在AS中的表达量, 使用实时荧光定量聚合酶联反应技术(RT-qPCR)检测lncR-Malat1、miR-124-3p和Lamc1的基因表达变化。采用双荧光素酶报告基因实验验证lncR-Malat1与miR-124-3p之间存在靶向结合位点。使用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测最有利于AS生长的人参皂苷Rg1浓度。通过蛋白质印迹法(Western blot)检测人参皂苷Rg1对AS分泌神经生长因子(NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、层粘连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)表达量的影响及lncR-Malat1表达量改变后对人参皂苷Rg1该功能的影响。两组间比较采用t检验, 多组间比较采用单因素方差分析。结果 lncR...
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关 键 词: | 人参皂苷Rg1 星形胶质细胞 脊髓损伤 双荧光素酶 表观遗传学 |
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