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| SYBR Green I实时荧光PCR检测VTKORC1和CYP2C9基因型 | |
| 引用本文： | 吴海丽,向道康,黄凌,安邦权,李贵芳,黄盛文. SYBR Green I实时荧光PCR检测VTKORC1和CYP2C9基因型[J]. 江苏医药, 2011, 37(15) |
| 作者姓名： | 吴海丽 向道康 黄凌 安邦权 李贵芳 黄盛文 |
| 作者单位： | 1. 贵州省人民医院科教处,贵阳市,550002 2. 贵州省人民医院心脏外科,贵阳市,550002 3. 贵州省人民医院检验科,贵阳市,550002 |
| 基金项目： | 贵州省科技厅基金资助项目 |
| 摘 要： | 目的 建立一种检测维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)和细胞色素P450 2C9(CYP2C9)基因型的SYBR GreenI实时荧光PCR法.方法 提取134例心脏瓣膜置换术患者的外周血基因组DNA.针对VKORC11173C>T和CYP2C9 1075A>C两个单核苷酸多态性(SNP)位点,分别设计一套等位基因特异性引物.PCR反应体系中加入荧光染料SYBR Green I,样本经扩增后结合熔解曲线分析,确定每个样本的基因型.结果 VKORC1 1173C>T和CYP2C9 1075A>C两个SNP位点的不同基因型具有不同的熔解曲线峰型.134例患者中,VKORC1 1173C>T基因型TT、TC和CC分别有111例、21例和2例,各占82.8%、15.7%和1.5%;CYP2C9 1075A>C基因型*1/*1和*1/*3分别有121例和13例,各占90.3%和9.7%,未检出纯合子*3/*3基因型.结论 基于荧光染料SYBR Green I的实时荧光PCR分型方法操作简便、价格低廉、结果准确可靠,适于临床实验室对VKORC1 1173C>T和CYP2C9 1075A>C的基因分型. |
| 关 键 词： | 维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1 细胞色素P450 2C9 华法林 |
Detection of VKORC1 and CYP2C9 genotypes by SYBR Green I-based real-time PCR |
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