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实时荧光PCR直接检测样本中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌应用研究
引用本文:黄其建,张进,李静,丁燕,曾韵,王雅杰,喻华,肖华亮,吕云霞. 实时荧光PCR直接检测样本中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌应用研究[J]. 标记免疫分析与临床, 2016, 23(2). DOI: 10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.02.024
作者姓名:黄其建  张进  李静  丁燕  曾韵  王雅杰  喻华  肖华亮  吕云霞
作者单位:四川省什邡市人民医院检验科,四川什邡,618400;北京天坛医院临床医学实验室,北京;四川省人民医院检验科,四川成都,610072
基金项目:德阳市科技局立项项目(2013SZ002)
摘    要:目的 探讨实时荧光PCR直接检测病人样本中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的应用价值.方法 对80例经VITEK2COMPACT药敏鉴定系统鉴定为有金黄色葡萄球菌生长(其中MRSA40例,MSSA40例)及20例未检出金黄色葡萄球菌的患者样本进行实时荧光PCR扩增,检测样本中金黄色葡萄球菌特异性核酸片段(耐热核酸酶基因nuc)及耐药基因(mecA)并与药敏鉴定比较,判断实时荧光PCR法检测MRSA的敏感性及特异性;对于两种方法检测结果不一致的18例样本重新接种培养,收集金黄色葡萄球菌菌株进行实时荧光PCR扩增,检测nuc基因及mecA基因,以期发现两种方法检测结果差异原因.结果 100例临床样本两种方法检测结果一致共82例,其中MRSA一致40例,MSSA一致22例,非金葡20例;两种方法检测结果不一致18例,均为PCR基因检测为MRSA而药敏鉴定为MSSA.MRSA检测药敏鉴定阳性40例,检出率为40%,PCR基因检测阳性58例检出率为58%;PCR基因检出率明显高于药敏鉴定,二者结果差异有显著性(P<0.05);以药敏鉴定为标准,PCR基因检测MRSA的敏感性为100%,特异性为70%;18例金黄色葡萄球菌菌株实时荧光PCR检测MRSA结果与药敏鉴定一致.结论 实时荧光PCR直接检测患者样本中MSSA具有高度敏感性及特异性,但检测MRSA会受到样本中其他含有mecA基因菌的干扰,对于临床结果解释需慎重.即便如此,该方法对于MRSA检测在院感防控方面仍有重要意义.

关 键 词:耐甲氧西林  金黄色葡萄球菌  mecA基因  nuc基因  实时荧光PCR

Application of Real-time Fluorescence PCR Technique to Detect Samples of Methicillin-resistant Staphylococcus Aureus
Abstract:
Keywords:Methicillin-resistant  Staphylococcus aureus  mecA gene  nuc gene  Real-time fluorescent PCR
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