miR-10b通过抑制KLF4表达诱导胃癌细胞对顺铂耐药

背景胃癌(gastric cancer, GC)化疗容易产生获得性化疗耐药.miR-10b能参与调节食管癌和鼻咽癌细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药,而在GC中其与DDP化疗敏感性的关系并不清楚.目的探讨miR-10b是否参与GC细胞对DDP耐药,以及其中的分子机制.方法采用DDP反复刺激SGC-7901和MGC-803细胞并浓度递增法构建SGC-7901/DDP和MGC-803/DDP细胞.检测SGC-7901/DDP和MGC-803/DDP细胞中mi R-10b和KLF4的表达.对SGC-7901和MGC-803细胞转染慢病毒携带的miR-10b过表达载体, MTT法检测miR-10b过表达对DDP敏感性的影响; Annexin V-FITC/PI染色法检测miR-10b过表达对DDP诱导的细胞凋亡的影响; RT-qP CR和Western blot检测miR-10b过表达对KLF4mR NA和蛋白表达的影响.进一步构建异体移植瘤模型,并给予DDP化疗后,宏观观察瘤体形态并称量瘤体质量.对SGC-7901和MGC-803细胞共转染miR-10b和KLF4后,MTT法检测细胞对DDP敏感性变化.结果与SGC-7901和MGC-803细胞比较, SGC-7901/DDP和MGC-803/DDP细胞中miR-10b表达水平显著增加(P 0.01),KLF4mRNA和蛋白水平显著降低(P 0.01).体外实验显示,过表达miR-10b促进GC细胞对DDP耐药,抑制KLF4表达(P0.01);在体实验显示, DDP治疗后, miR-10b组瘤体质量显著高于NC组(P0.01).过表达KLF4能部分逆转过表达miR-10b诱导的GC细胞对DDP耐药.结论miR-10b通过抑制KLF4表达促进GC细胞DDP化疗耐药,而miR-10b高表达产生的DDP耐药性可以被上调KLF4解除.