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| 腺病毒介导siRNA抑制人胃腺癌细胞VEGF表达 | |
| 引用本文： | 褚衍六,赵幼安,顾晓萌,宋现让,杨艳. 腺病毒介导siRNA抑制人胃腺癌细胞VEGF表达[J]. 山东大学学报(医学版), 2006, 44(2): 161-165 |
| 作者姓名： | 褚衍六 赵幼安 顾晓萌 宋现让 杨艳 |
| 作者单位： | 1. 山东大学齐鲁医院消化科,山东,济南,250012 2. 山东省肿瘤医院基础研究中心,山东,济南,250117 3. 山东省科学院中日友好生物技术研究中心,山东,济南,250014 |
| 摘 要： | 目的:构建重组腺病毒Ad-siRNA-VEGF并观察其抑制人胃腺癌细胞(MGC-803)血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的效果。方法:①选择针对人VEGFmRNA的特异性siRNA靶序列,设计、合成其相应的双链DNA,插入pSUPER质粒,得到psiRNA-VEGF;NotⅠ和XhoⅠ双酶切psiRNA-VEGF得siRNA-VEGF表达片段;插入腺病毒穿梭质粒pAdTrack,构建pAdTrack-siR-NA-VEGF,后者与骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重组后,酶切鉴定、293细胞包装、扩增,得到重组腺病毒Ad-siRNA-VEGF;②Ad-siRNA-VEGF转染MGC-803细胞96h后,RealTimePCR检测细胞VEGFmRNA水平、ELISA测定细胞培养液上清VEGF蛋白浓度。结果:成功构建重组腺病毒Ad-siRNA-VEGF,293细胞包装1d后观察到绿色荧光蛋白表达,氯化铯梯度离心纯化获得约3.6×108efu/ml滴度的重组腺病毒;Ad-siRNA-VEGF转染MGC-803细胞96h后,其VEGFmRNA水平下降了67.1%,培养液上清VEGF蛋白浓度下降了72.5%(P<0.01)。结论:腺病毒介导的RNAi技术可显著抑制人胃腺癌细胞的VEGF表达,这为抗血管生成治疗肿瘤的进一步研究开辟了新的方向。 |
| 关 键 词： | 胃肿瘤 RNA干扰 腺病毒 表皮生长因子 |
| 文章编号： | 1671-7554（2006）02-0161-05 |
| 收稿时间： | 2005-04-22 |
| 修稿时间： | 2005-04-22 |
Knock-down of VEGF by adenovirus-delivered siRNA in human gastric adenocarcinoma cells |
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| CHU Yan-liu,ZHAO You-an,GU Xiao-meng,SONG Xian-rang,YANG Yan. Knock-down of VEGF by adenovirus-delivered siRNA in human gastric adenocarcinoma cells[J]. Journal of Shandong University:Health Sciences, 2006, 44(2): 161-165 | |
| Authors: | CHU Yan-liu ZHAO You-an GU Xiao-meng SONG Xian-rang YANG Yan |
| Abstract: | |
| Keywords: | Stomach neoplasms RNA interference Adenovirus Epidermal growth factor |
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