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结直肠癌细胞源性外泌体中miR-17-5p的表达对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响及其机制
作者姓名:刘珊  邢兆东  黄平
作者单位:1. 海南省人民医院肛肠外科;2. 中国医学科学院肿瘤医院胰胃外科
摘    要:目的:分析结直肠癌细胞源性外泌体(Exo)中微小RNA-17-5p (miR-17-5p)表达对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响,阐明其可能的作用机制。方法:实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测人结直肠癌HCT116细胞、CT26细胞、LoVo细胞、HT29细胞、SW620细胞、SW480细胞和人正常结肠直肠黏膜上皮HIEC细胞中miR-17-5p表达水平。CT26细胞分为对照组、miR-NC inhibitor组和miR-17-5p inhibitor组,提取各组细胞Exo,透射电子显微镜观察Exo形态表现,纳米粒子跟踪分析法检测粒径分布情况,Western blotting法检测Exo中标志蛋白CD9、CD63、凋亡诱导因子6互作蛋白(Alix)和肿瘤易感基因101 (TSG101)蛋白表达水平,RT-qPCR法检测Exo中miR-17-5p表达水平。CT26细胞分为对照组、Exo组、Exo-miR-NC inhibitor组和Exo-miR-17-5p inhibitor组,分别以不同转染组CT26细胞源性Exo处理CT26细胞,Exo绿色荧光标记PKH67染料示踪法观察各组...

关 键 词:结直肠肿瘤  外泌体  微小RNA-17-5p  化疗敏感性  细胞自噬
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