| 人大肠癌细胞系HCT116中Sirt 1基因敲除细胞株的构建 |
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| 引用本文： | 贾一帆,张慧慧,王卫星,杜润蕾.人大肠癌细胞系HCT116中Sirt 1基因敲除细胞株的构建[J].医学研究杂志,2012,41(5):42-45. |
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| 作者姓名： | 贾一帆 张慧慧 王卫星 杜润蕾 |
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| 作者单位： | 1. 430060,武汉大学人民医院麻醉科
2. 430072,武汉大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家重大研究计划项目:科技部“973”基金资助项目(2011CB944404);湖北省自然科学基金资助项目(2010CDB08704) |
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| 摘 要： | 目的利用AAV介导的体细胞基因敲除技术,在人大肠癌细胞系HCT116中对靶基因Sirt 1进行敲除,达到基因沉默的目的。方法构建Sirt1打靶载体,通过病毒包装、感染、药物筛选、PCR鉴定、Western blotting鉴定等步骤获得Sirt 1基因敲除的细胞株。结果经过筛选和鉴定后获得两个Sirt1-/-阳性克隆,成功构建HCT116 Sirt1-/-细胞系。结论通过体细胞敲除技术,我们成功地获得Sirt1敲除肠癌细胞株。
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| 关 键 词： | 体细胞基因敲除 同源重组 Sirt 1 |
| 收稿时间： | 2011/10/17 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2012/10/20 0:00:00 |
Construction of Sirt1-/- Cell Line in HCT116.Jia Yifan, Zhang Huihui, Wang Weixing,Du Runlei |
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| Jia Yifan
,
Zhang Huihui
,
Wang Weixing
,
Du Runlei.Construction of Sirt1-/- Cell Line in HCT116.Jia Yifan, Zhang Huihui, Wang Weixing,Du Runlei[J].Journal of Medical Research,2012,41(5):42-45. |
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| Authors: | Jia Yifan Zhang Huihui Wang Weixing Du Runlei |
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| Institution: | .College of Life Sciences and Renmin Hospital,Wuhan University,Hubei 430060,China |
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| Abstract: | Objective To constructe of Sirt 1-/-cell line in HCT116 using the AAV knockout system.Methods We constructed targeting vector of Sirt1.After virus packaging,infecting,drug screening,PCR verification and western blotting,we got HCT116 Sirt-/-cell line.Results we constructed HCT116 Sirt 1-/-cell line successfully.Conclusion We successfully constructed the Sirt1-knockout cell line in HCT116. |
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| Keywords: | Somatic cell line gene knockout Homologous recombination Sirt1 |
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