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稳定表达人热休克蛋白22内皮细胞株的构建和鉴定
引用本文:鲍慧慧,陈 琦,王 玲,程晓曙. 稳定表达人热休克蛋白22内皮细胞株的构建和鉴定[J]. 中国组织工程研究, 2011, 15(50): 9433-9436. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.50.030
作者姓名:鲍慧慧  陈 琦  王 玲  程晓曙
作者单位:南昌大学第二附属医院心内科,南昌大学心血管疾病研究所,江西省南昌市 330006
基金项目:国家自然基金青年科学基金资助项目(30800467);江西省自然基金资助项目(0640089)。
摘    要:背景:热休克蛋白22的应激表达可能对缺氧复氧内皮具有一定的保护作用。目的:建立稳定表达人热休克蛋白22基因的内皮细胞株。方法:EcoRⅠ/kpnⅠ双酶切鉴定真核表达重组质粒pEGFP-N1-HSP22。脂质体法以重组质粒pEGFP-N1-HSP22转染人脐静脉内皮细胞,G418筛选,获得G418抗性单克隆细胞。用荧光显微镜、RT-PCR及Western-blot检测热休克蛋白22在人脐静脉内皮细胞中的表达。结果与结论:经双酶切电泳检测重组质粒pEGFP-N1-HSP22符合预期大小片段。稳定转染的单克隆人脐静脉内皮细胞中,荧光显微镜观察到每个细胞均有绿色荧光蛋白表达,RT-PCR和Western-blot检测到热休克蛋白22mRNA和蛋白表达。说明成功获得稳定表达人热休克蛋白22基因的内皮细胞株。

关 键 词:热休克蛋白22  人脐静脉内皮细胞  稳定表达  转染  质粒  
收稿时间:2011-05-21

Construction and identification of endothelial cell lines stably expressing human heat shock protein 22
Bao Hui-hui,Chen Qi,Wang Ling,Cheng Xiao-shu. Construction and identification of endothelial cell lines stably expressing human heat shock protein 22[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2011, 15(50): 9433-9436. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.50.030
Authors:Bao Hui-hui  Chen Qi  Wang Ling  Cheng Xiao-shu
Affiliation:Department of Cardiology, Second Affiliated Hospital of Nanchang University, Institute of Cardiovascular Disease of Nanchang University, Nanchang  330006, Jiangxi Province, China
Abstract:
Keywords:
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