Triton X-100洗涤剂对抗原包被效率的影响及其对策

目的: 观察抗原中残留的洗涤剂成分在间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆时, 对抗原包被效率的影响以及相应的对策.方法: 以卵白蛋白(OVA)、卵运铁蛋白(OT)和本室制备的相应的单克隆抗体(mAb)作为实验模型, 在抗原中加入不同浓度梯度的Triton X-100包被ELISA板, 用相应的mAb细胞株培养上清做间接ELISA, 确定Triton X-100对包被效率的影响.结果: 当包被抗原中Triton X-100的浓度为3×10-6(v/v)时, 可以明显抑制包被效率, 当Triton X-100的浓度为1.6×10-4(v/v)时几乎可以完全抑制抗原的包被;在含有一定浓度Triton X-100的条件下, 提高抗原的浓度, 或适当增大包被过程中的稀释倍数, 可以明显提高包被效率.结论: 洗涤剂对抗原包被有较强的影响, 在抗体制备过程中, 应尽量提高抗原的初始浓度, 降低洗涤剂的浓度, 设计合理的针对含有洗涤剂抗原的ELISA筛选方案, 是mAb制备成功的关键之一.