整合素αvβ3小干扰RNA载体构建及其对人视网膜血管内皮细胞的干扰效应检测

目的设计和构建整合素αvβ3（integrin αvβ3）特异性的小干扰RNA表达载体，并初步验证其对靶基因的抑制作用j方法设计靶点特异性的寡核苷酸，连接到经BamH 1-Hind Ⅲ酶切线性化的pGCsilencer2．0-U6质粒上，转染重组质粒到人视网膜血管内皮细胞，通过免疫印迹（Western印迹）及逆转录（RT-PCR）实验检测靶基因的抑制情况。结果成功构建pGCU6-ITGαv和pGCU6-ITGβ3 siRNAs重组质粒，转染人视网膜血管内皮细胞，Western印迹，RT-PCR结果证实重组质粒在蛋白及mRNA水平均能抑制整合素αvβ3的表达。结论成功构建了针对整合素αvβ3的siRNA质粒，该质粒可抑制整合素αvβ3在人视网膜血管内皮细胞中的表达。