| 重组2型腺相关病毒-人骨形成蛋白7转染犬髓核细胞及其对髓核细胞表型的影响 |
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| 引用本文： | 王超锋,阮狄克,张 超,王德利,辛洪奎,张 燕. 重组2型腺相关病毒-人骨形成蛋白7转染犬髓核细胞及其对髓核细胞表型的影响[J]. 中国脊柱脊髓杂志, 2010, 20(11): 907-912. DOI: 10.3969/j.issn.1004-406X.2010.11.07 |
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| 作者姓名： | 王超锋 阮狄克 张 超 王德利 辛洪奎 张 燕 |
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| 作者单位： | 海军总医院骨科,100048,北京市海淀区阜成路6号 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点支持项目 |
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| 摘 要： | 目的:观察重组2型腺相关病毒-人骨形成蛋白7(recombinant adeno-associated virus-2expressinghuman bone morphogenetic protein-7,rAAV2-hBMP7)转染犬髓核细胞情况及其对细胞表型的影响。方法:用1岁龄Beagle犬L4/5椎间盘髓核进行髓核细胞体外培养,取第2代髓核细胞进行实验,实验组以rAAV2-hBMP7(1×105v.g/细胞)转染髓核细胞,对照组以重组2型腺相关病毒-增强型绿色荧光蛋白(recombinantadeno-associated virus-2expressing enhanced green fluorescent protein,rAAV2-EGFP)转染髓核细胞。在转染后4d、7d和14d以PCR检测髓核细胞中hBMP7的mRNA表达,在转染后7d和14d以Western blot法检测髓核细胞中hBMP7蛋白表达。在转染后4d、7d和14d采用RT-PCR法检测蛋白多糖、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的mRNA含量,采用二甲基蓝及ELISA法分别检测蛋白多糖、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的蛋白含量。结果:实验组髓核细胞表达hBMP7 mRNA及蛋白,并于转染后7d时表达量最高,而对照组无表达。实验组髓核细胞蛋白多糖mRNA及蛋白含量在转染后7d和14d时较4d时明显增高,14d时较7d时亦明显升高(P0.05),对照组各时间点无统计学差异(P0.05);4d时实验组与对照组比较无明显差异,7d和14d时较对照组明显增加(P0.05)。同组各时间点Ⅰ型胶原mRNA及蛋白含量均无统计学差异,两组各时间点间比较无统计学差异(P0.05)。实验组髓核细胞Ⅱ型胶原mRNA及蛋白含量在转染后7d和14d时较4d时明显增高,14d时较7d亦明显升高(P0.05),对照组各时间点无统计学差异(P0.05);实验组4d时与对照组比较无明显差异,7d和14d时较对照组明显增加(P0.05)。结论:rAAV2-hBMP7转染犬髓核细胞后能表达hBMP7蛋白,并能提高其蛋白多糖及Ⅱ型胶原含量。
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| 关 键 词： | 基因转染 人骨形成蛋白7 重组2型腺相关病毒 髓核细胞 |
| 收稿时间： | 2010-07-27 |
| 修稿时间： | 2010-09-27 |
Effects of adeno-associated virus-2 mediated human BMP-7 gene transfection on the phenotype of nucleus pulposus cells |
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| WANG Chaofeng,RUAN Dike,ZHANG Chao. Effects of adeno-associated virus-2 mediated human BMP-7 gene transfection on the phenotype of nucleus pulposus cells[J]. Chinese Journal of Spine and Spinal Cord, 2010, 20(11): 907-912. DOI: 10.3969/j.issn.1004-406X.2010.11.07 |
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| Authors: | WANG Chaofeng RUAN Dike ZHANG Chao |
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| Affiliation: | WANG Chaofeng,RUAN Dike,ZHANG Chao,et al Department of Orthopaedic Surgery,Navy General Hospital,Beijing,100048,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gene transfection Bone morphogenetic protein-7 Recombinant adeno-associated virus type-2 Nucleus pulposus cell |
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