大鼠肝纤维化进程中原代Kupffer细胞吞噬能力及表型变化特征研究

目的考察肝纤维化不同阶段原代Kupffer细胞吞噬能力及M1型和M2型Kupffer细胞占比的变化趋势。方法 SD大鼠腹腔注射CCl4,每周2次,连续注射8周诱导肝纤维化。分别于第0、2、4、8周分离肝脏Kupffer细胞。采用墨汁吞噬实验考察Kupffer细胞的吞噬能力,采用ELISA检测Kupffer细胞中IL-1β、IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、TGF-β1的含量,采用CD68抗体、CD86抗体和CD163抗体对肝脏巨噬细胞、M1型Kupffer细胞、M2型Kupffer细胞进行标记,流式细胞法分离不同的Kupffer细胞并计数M1型和M2型Kupffer细胞占比。结果模型大鼠炎症损伤加重,第8周呈现明显的纤维化特征。模型大鼠Kupffer细胞吞噬能力持续降低。M1型Kupffer细胞及IL-1、IL-2、IL-6、TNF-α呈现先升后降的趋势,在第4周达到最高值。M2型Kupffer细胞及IL-10和TGFβ1则持续升高。结论肝纤维化形成过程中,Kupffer细胞吞噬能力持续降低。M1型和M2型Kupffer细胞均参与了肝纤维化发生发展过程。