|
|||||
|
|
| 稳定表达HBx的肝前体细胞株的构建及其对增殖的影响 | |
| 引用本文： | 芦永良,申利红,李红丽,胡代曦,张锡峰,胡斌,冯涛,黄佳祎.稳定表达HBx的肝前体细胞株的构建及其对增殖的影响[J].细胞与分子免疫学杂志,2013,29(3):256-260. |
| 作者姓名： | 芦永良 申利红 李红丽 胡代曦 张锡峰 胡斌 冯涛 黄佳祎 |
| 作者单位： | 1. 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆,400016 2. 重庆医科大学细胞生物学遗传学教研室,重庆,400016 3. 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆400016;重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室,重庆400016 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(81071770,81201679) |
| 摘 要： | 目的 构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝前体细胞株,检测对肝前体细胞增殖,细胞周期及Wnt/β-catemn信号通路的影响.方法 重组质粒pSEB-Flag-HBx与包装质粒pAmpho共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,包装获得携带HBx基因的重组逆转录病毒,并感染小鼠肝前体细胞HP14.5,稻瘟菌素(blasticidin)筛选出稳定表达HBx基因的细胞克隆并扩大培养(HP14.5/HBx组),设HP14.5/Rv(空质粒pSEEB-Flag感染组)及空细胞组HP14.5组为对照组.MTS比色法检测各组细胞的增殖活力,流式细胞术检测细胞周期中各时相所占的比例,荧光定量PCR检测cyclin D1和c-myc mRNA的表达量,Western blot法检测HBx、GSK3β、p-GSK3β(ser-9)、β-catenin、cyclin D1以及c-myc等蛋白的表达.结果 RT-PCR和Western blot法检测到HBx基因和蛋白阳性表达,与对照组相比,HP14.5/HBx细胞增殖活力显著增加(P＜0.05)；G1细胞比例明显减少(P＜0.05),S期和G2细胞比例显著升高(P＜0.05)；cyclin D1和c-myc mRNA的表达量显著升高(P ＜0.05); GSK3β蛋白水平表达无明显变化(P＞0.05),p-GSK3β、β-catenin、cyclin D1和c-myc蛋白的表达水平显著升高(P＜0.05).结论 成功筛选出稳定表达HBx的肝前体细胞株,HBx通过活化Wnt/β-catenin信号途径促进肝前体细胞的增殖. |
| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒X蛋白 肝前体细胞 细胞增殖 wnt/β-catenin信号途径 |
Establishment of hepatic stem cell line stably expressing HBx protein and the effect of HBx on cell proliferation |
|
| LU Yongliang,SHEN Lihong,LI Hongli,HU Daixi,ZAHNG Xifeng,HU Bin,FENG Tao,HUANG Jiayi.Establishment of hepatic stem cell line stably expressing HBx protein and the effect of HBx on cell proliferation[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2013,29(3):256-260. | |
| Authors: | LU Yongliang SHEN Lihong LI Hongli HU Daixi ZAHNG Xifeng HU Bin FENG Tao HUANG Jiayi |
| Institution: | 1,2* 1Research Center of Molecular Medicine and Cancer;2Department of Pathophysiology;3Department of Cell Biology and Medical Genetics,College of Basic Medicine,Chongqing Medical University,Chongqing 400016,China |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |