血小板膜糖蛋白αⅡbA477P（A446P）突变对αⅡbβ3复合物表达的影响（英文）

目的：探讨血小板膜糖蛋白αⅡbA477P（A446P）突变对αⅡbβ3蛋白表达的影响。方法：用重叠延伸PCR法对正常的αⅡb-pcDNA3.1＋质粒载体进行体外定点诱变,构建了αⅡbA477P突变质粒载体;经体外真核细胞COS-7细胞转染试验后,从转录水平、蛋白质水平和膜表面复合物水平检测突变体在真核细胞内的表达。结果：突变的αⅡbA477P（A446P）基因在真核细胞内有转录,Western印迹显示细胞内有αⅡb蛋白的表达,但突变αⅡbA477P（A446P）β3复合物在细胞膜表面的表达量仅为正常αⅡbβ3复合物的12.95%。结论：αⅡbA477P（A446P）显著降低了αⅡbβ3复合物在细胞膜表面的表达,其机制可能是该位点的突变干扰了αⅡb和β3正常结合或者影响了αⅡb蛋白的正常构型。