白细胞介素-10基因修饰的兔脂肪来源间充质干细胞的构建及其对自体外周血Th17细胞的免疫调控

目的　探究白细胞介素10（interleutin 10，IL-10)基因修饰的兔脂肪来源间充质干细胞（adipose mesenchymal stem cells，ADSCs）对自体外周血Th17细胞的免疫调控作用。方法　构建IL-10 基因修饰的兔脂肪来源间充质干细胞(interleukin-10 gene-modified adipose mesenchymal stem cells，IL-10-ADSCs)及荧光蛋白标记的兔脂肪来源间充质干细胞（green fluorescent protein-adipose mesenchymal stem cells，GFP-ADSCs），定量即时聚合酶链锁反应(quantitative real time polymerase chain reaction，Q-PCR)及Western blot检测细胞IL-10基因及蛋白表达水平。分离培养兔泪腺上皮细胞及自体外周血淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)建立淋巴细胞体外激活共培养体系，分组按PBMCs∶ADSCs为5∶1的比例加入等量ADSCs、IL-10-ADSCs及GFP-ADSCs，同时以等比例的成人真皮成纤维细胞-α作为对照组，Q-PCR检测各组Th17细胞相关基因mRNA表达水平。结果　成功构建IL-10-ADSCs和GFP-ADSCs，荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）表达率达80%以上。Q-PCR及Western blot检测结果显示，IL-10-ADSCs组IL-10 mRNA及蛋白表达水平均高于GFP-ADSCs组，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。与对照组相比，ADSCs组、IL-10-ADSCs组及GFP-ADSCs组均可降低兔外周血Th17细胞相关细胞因子IL-17及转录因子维甲酸相关孤独受体C mRNA表达水平（均为P＜0.05），且IL-10-ADSCs组降低效果显著高于ADSCs组及GFP-ADSCs组，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。结论　IL-10-ADSCs可抑制Th17细胞分化相关基因的表达水平，具有抑制Th17细胞分化的潜能。

Construction of interleukin-10 gene-modified rabbit adipose derived mesenchymal stem cells and its immunomodulatory effects on autologous peripheral blood Th17 cells