丁苯酞对缺血性脑卒中大鼠海马神经元凋亡的抑制作用及其对p38 MAPK信号通路的影响

目的：探讨丁苯酞对缺血性脑卒中大鼠海马神经元凋亡和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路的影响，阐明丁苯酞对缺血性脑卒中的作用机制。方法： 102只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丁苯酞组，每组34只。模型组和丁苯酞组大鼠采用改良Zea-Longa法制备局灶性脑缺血大鼠模型，丁苯酞组大鼠建模后给予丁苯酞（4.5 mg·kg^-1）治疗，假手术组大鼠每天相同时间点腹腔注射等量生理盐水。采用HE染色观察大鼠海马神经元细胞形态表现，原位末端转移酶标记（TUNEL）染色观察大鼠海马神经元凋亡情况，Western blotting法测定大鼠海马组织中激活型caspase-3（cleaved caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、p38、磷酸化p38（p-p38）和分裂原激活的蛋白激酶（MAPK）蛋白表达水平，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定大鼠海马组织中cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、p38和MAPK mRNA表达水平。结果：假手术组大鼠海马CA1区神经元排列整齐，细胞核和细胞膜正常；模型组大鼠海马CA1区神经元排列紊乱，细胞肿胀破裂，细胞核固缩；丁苯酞组大鼠海马CA1区部分神经细胞结构恢复正常。与假手术组比较，模型组大鼠海马CA1区神经元数量明显降低（P<0.01），神经元凋亡指数明显增加（P<0.01）；与模型组比较，丁苯酞组大鼠海马CA1区神经元数量明显增加（P<0.01），神经元凋亡指数明显降低（P<0.01）。与假手术组比较，模型组大鼠海马组织中cleaved caspase-3、Bax、p-p38和MAPK蛋白表达水平明显升高（P<0.01），Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与模型组比较，丁苯酞组大鼠海马组织中cleaved caspase-3、Bax、p-p38和MAPK蛋白表达水平明显降低（P<0.01），Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。与假手术组比较，模型组大鼠海马组织中cleaved caspase-3、Bax和MAPK mRNA表达水平明显升高（P<0.01），Bcl-2 mRNA表达水平明显降低（P<0.01）；与模型组比较，丁苯酞组大鼠海马组织中cleaved caspase-3、Bax和MAPK mRNA表达水平明显降低（P<0.01），Bcl-2 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。结论：丁苯酞可通过抑制海马组织p38 MAPK信号通路抑制缺血性脑卒中大鼠海马神经元凋亡。

Inhibitory effect of butylphthalide on hippocampal neuron apoptosis in ischemic stroke rats and itsinfluence in p38 MAPK signaling pathway