| HSV-2NP6与IL-18真核表达载体的构建与表达 |
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| 引用本文： | 焦凤萍,刘莉,于爱莲,王玉,于广福.HSV-2NP6与IL-18真核表达载体的构建与表达[J].中国病原生物学杂志,2011(6). |
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| 作者姓名： | 焦凤萍 刘莉 于爱莲 王玉 于广福 |
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| 作者单位： | 泰山医学院病原学教研室;聊城市疾病预防控制中心; |
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| 基金项目： | 山东省自然科学基金项目(No.ZR2009CQ003); 山东省卫生厅资助课题(No.2007HZ037) |
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| 摘 要： | 目的在前期筛选的HSV-2gD模拟抗原表位序列P6的基础上,在GenBank上选取与P6序列相对应且相似的HSV-2天然野生株gD的基因序列NP6,以pcDNA3.1(-)为载体、IL-18为佐剂,构建和表达NP6与IL-18串联的重组表达质粒,并观察免疫小鼠后的效果。方法采用串联简并引物PCR法构建重组质粒pcDNA3.1-IL18-NP6和pcDNA3.1-IL18。将构建的真核表达质粒pcDNA3.1-IL-18和pcDNA3.1-IL-18-HSVNP6肌内注射免疫BALB/c小鼠3次,每次间隔1周。末次免疫后1周眼眶静脉采血,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体滴度、IFN-γ及IL-18含量。结果构建的串联重组质粒pcDNA3.1-IL18-NP6和pcDNA3.1-IL18经酶切及测序显示基因序列完全正确,间接免疫荧光、Western blot检测证实模拟抗原表位序列NP6具有近似天然序列的生物学活性;用表达质粒免疫小鼠,可刺激产生高滴度的特异性抗体,并可产生较高水平的IL-18和IFN-γ。结论成功构建和表达了重组质粒pcDNA3.1-IL18-NP6,表达产物具有免疫原性。
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| 关 键 词： | 单纯疱疹病毒 IL-18 模拟抗原表位 真核表达 |
Construction and expression of a eukaryotic expression vector of HSV-2NP6 and IL-18 |
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| JIAO Feng-ping,LIU Li,YU Ai-lian,WANG Yu,YU Guang-fu.Construction and expression of a eukaryotic expression vector of HSV-2NP6 and IL-18[J].Journal of Pathogen Biology,2011(6). |
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| Authors: | JIAO Feng-ping LIU Li YU Ai-lian WANG Yu YU Guang-fu |
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| Institution: | JIAO Feng-ping1,LIU Li2,YU Ai-lian1,WANG Yu1,YU Guang-fu1 (1.Taishan Medical University,Taian 271000,Shandong,China,2.Center for Disease Control and Prevention of the City of Liaocheng) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Herpes simplex virus interleukin-18 mimotope eukaryotic expression |
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