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多重PCR特异检测布鲁氏菌方法的建立
引用本文:杜昕颖,陈泽良,王玉飞,乔凤,赵瑾,苑锡铜,黄留玉. 多重PCR特异检测布鲁氏菌方法的建立[J]. 解放军预防医学杂志, 2008, 26(5)
作者姓名:杜昕颖  陈泽良  王玉飞  乔凤  赵瑾  苑锡铜  黄留玉
作者单位:军事医学科学院疾病预防控制所,北京,100071;军事医学科学院疾病预防控制所,北京,100071;军事医学科学院疾病预防控制所,北京,100071;军事医学科学院疾病预防控制所,北京,100071;军事医学科学院疾病预防控制所,北京,100071;军事医学科学院疾病预防控制所,北京,100071;军事医学科学院疾病预防控制所,北京,100071
摘    要:目的建立一种快速检测布鲁氏菌的多重PCR方法,为临床快速检测、准确诊断布鲁氏菌提供依据。方法针对布鲁氏菌外膜蛋白31 kD、22 kD和2a基因,各设计一对引物,扩增片断大小分别为427 bp3、17 bp和830 bp。利用纯培养物和模拟标本,分析这3对引物的特异性和敏感性。结果3对引物均能特异扩增布鲁氏菌的DNA,31 kD、22 kD和2a,扩增纯培养物的敏感性分别为2.8×103、4.6×103和2.1×104cfu,将3对引物组合在一起建立了多重PCR方法,能从模拟的细胞和血液标本中扩增出特异的产物,对模拟的细胞感染标本的敏感性为1×105cfu,对模拟的血标本的敏感性为1.2×106cfu。结论针对外膜蛋白基因,建立了能特异地检测标本中布鲁氏菌的多重PCR检测方法。

关 键 词:多重PCR  布鲁氏菌  外膜蛋白

DEVELOPMENT OF A MULTIPLEX PCR FOR BRUCELLA DETECTION
DU Xin-ying,CHEN Ze-liang,WANG Yu-fei,QIAO Feng,ZHAO Jin,YUAN Xi-tong,HUANG Liu-yu. DEVELOPMENT OF A MULTIPLEX PCR FOR BRUCELLA DETECTION[J]. Journal of Preventive Medicine of Chinese People's Liberation Army, 2008, 26(5)
Authors:DU Xin-ying  CHEN Ze-liang  WANG Yu-fei  QIAO Feng  ZHAO Jin  YUAN Xi-tong  HUANG Liu-yu
Abstract:
Keywords:multiplex PCR  Brucella  outer membrane protein  gene
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