油红o显示培养平滑肌细胞中的脂类

关于用油红O方法显示脂类,在国内外已被广泛应用。但用油红O方法显示培养的平滑肌细胞国内仍未见报导,也难以显示。国外虽有报导,但必须经过DMPA(N-N-demethyl-1,3-propa-mediaine)处理后才能使培养的平滑肌细胞中的脂类被油红O染色。从文献报导中多用家兔主动脉平滑肌进行培养,未见用人胎儿主动脉平滑肌进行培养,观察其脂类的分布。本室在抗衰老研究中以油红O显示整体主动脉染色基础上,进一步在细胞水平上观察细胞内脂质堆积情况和动脉粥样硬化病变状态。1培养液:用浓度为10%的高脂血清和LDL(低密度脂旦白)作培养液。2材料:引产或流产5个月胎儿主动脉平滑肌,HAO2-6(人动脉平滑肌细胞第二例第六代)。3步聚:(1)在无菌条件下将主动脉平滑肌剪成小块贴在盖玻片上,然后放入培养瓶中,于37℃温箱中培养:在10%的高浓度高脂血清中分别培养96,144,192小时;在LDL培养液中培养24和48小时。(2)将培养成活的平滑肌细胞(盖玻片上)从培养瓶中取出,必须用蒸馏水彻底洗掉浮在盖玻