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人B7-H4基因转染细胞的构建及其对T细胞的共刺激效应的初步研究
引用本文:毛一香,王勤,陈洁,陈永井,施勤,杨明峰,李文香,张学光. 人B7-H4基因转染细胞的构建及其对T细胞的共刺激效应的初步研究[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2005, 25(8): 609-613
作者姓名:毛一香  王勤  陈洁  陈永井  施勤  杨明峰  李文香  张学光
作者单位:1. 215007,苏州大学医学生物技术研究所;上海高校免疫学E-研究院
2. 215007,苏州大学医学生物技术研究所
基金项目:基金项目:国家自然科学基金重点资助项目(No.300330540);江苏省临床医学重点实验室资助项目
摘    要:目的 构建含有人B7-H4基因的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达B7-H4基因的1929细胞并初步研究其对T细胞的共信号作用及可能机制。方法从含人B7-H4基因的cDNA序列FLJ22418中,采用PCR扩增出B7-H4全长基因,双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ-HA-Term,与辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染1929细胞72h后,经Zeocin筛选出稳定表达B7-H4蛋白的L929细胞株;采用免疫荧光标记和流式细胞仪分析免疫分子的表达、^3H-TdR掺入检测细胞增殖以及ELISA测定细胞因子的水平。结果构建了含人B7-H4基因的重组逆转录病毒载体和获得含有B7-H4基因的重组病毒,筛选获得能稳定高表达人B7-H4蛋白的I_929转基因细胞;该转基因细胞对T细胞体外具有抑制增殖、活化和细胞因子分泌的作用。结论构建了稳定表达人B7-H4蛋白的细胞株,B7-H4分子在体外通过抑制T细胞分泌IL-2和促进其凋亡作用可显著地下调T细胞功能的效应。

关 键 词:B7-H4 共抑制分子 逆转录病毒 稳定表达 抑制 T细胞功能 基因转染细胞 步研究 重组逆转录病毒载体 刺激效应
收稿时间:2004-11-02
修稿时间:2004-11-02

Establishment of stable human B7-H4 gene transfectant and its costimulatory effect to T lymphocyte
MAO Yi-xiang,WANG Qin,CHEN Jie,CHEN Yong-jing,SHI Qin,YANG Ming-feng,LI Wen-xiang,ZHANG Xue-guang. Establishment of stable human B7-H4 gene transfectant and its costimulatory effect to T lymphocyte[J]. Chinese Journal of Microbiology and Immunology, 2005, 25(8): 609-613
Authors:MAO Yi-xiang  WANG Qin  CHEN Jie  CHEN Yong-jing  SHI Qin  YANG Ming-feng  LI Wen-xiang  ZHANG Xue-guang
Abstract:
Keywords:B7-H4   Co-inhibitor   Retrovirus   Stable expression   Inhibition
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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