凋亡诱导因子基因敲减对骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的影响

背景：众多基础与临床试验证实：骨髓间充质干细胞移植后的低存活率严重制约着其发挥长期的治疗效果。课题组前期研究发现凋亡相关因子在骨髓间充质干细胞凋亡过程中发挥了重要作用，其中凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)蛋白可能是其中一个关键因子。目的：将AIF敲减的骨髓间充质干细胞移植至小鼠梗死心肌中，验证低AIF表达骨髓间充质干细胞移植后的存活情况以及对进一步改善心功能的重要性。方法：首先，通过LV-AIF-shRNA慢病毒感染骨髓间充质干细胞下调AIF蛋白表达，应用流式细胞术及Western blot、RT-qPCR检测慢病毒的感染效率，CCK-8检测AIF敲减骨髓间充质干细胞在缺血缺氧条件下的细胞活力；然后，构建急性心肌梗死小鼠模型，分别将正常及AIF敲减的骨髓间充质干细胞移植至心肌梗死区域，免疫荧光检测AIF蛋白的表达，ELISA检测血清脑钠尿肽水平，心脏超声检测心功能，Masson染色观察心肌纤维化情况，RT-qPCR检测AIF敲减骨髓间充质干细胞移植后SRY基因表达反映细胞存活情况。结果与结论：(1)LV-AIF-shRNA慢病毒感染成功构建AI...