| 一种简单的PCR产物克隆方法 |
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| 引用本文： | 黄淑华,彭芝兰,王和. 一种简单的PCR产物克隆方法[J]. 华西医学, 2006, 21(2): 331-332 |
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| 作者姓名： | 黄淑华 彭芝兰 王和 |
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| 作者单位： | 四川大学华西第二医院妇产科,四川,成都,610041;四川大学华西第二医院妇产科,四川,成都,610041;四川大学华西第二医院妇产科,四川,成都,610041 |
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| 摘 要： | 目的分别将两段PCR产物hTERT及E1定向克隆到载体pShuttle中以构建重组质粒pShuttle-hTERT-E1。方法在合成PCR引物时两端对应加入线性化载体两端的15个碱基,这样PCR得到的产物两端就分别带上了15个和线性化载体两端重复的碱基序列,将纯化的产物与线性化载体以摩尔数为2∶1比例混和,溶于10μl的去离子水中,加入In-Fusion重组酶,在42℃下反应30分钟后转化,就可以实现类似同源重组的反应,将PCR产物定向克隆入目标载体上。结果经鉴定,成功构建出重组质粒pShuttle-hTERT-E1。结论无需传统的酶切、连接、去磷酸化等手段,利用In-fusion技术可快速、高效的完成PCR产物的定向克隆。
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| 关 键 词： | 多聚酶链式反应(PCR) 克隆 重组 |
| 文章编号： | 1002-0179(2006)02-0331-02 |
| 收稿时间： | 2005-10-11 |
| 修稿时间： | 2005-10-11 |
A Simple Way to Clone PCR Products |
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| HUANG Shu-hua,PENG Zhi-lan,WANG He. A Simple Way to Clone PCR Products[J]. West China Medical Journal, 2006, 21(2): 331-332 |
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| Authors: | HUANG Shu-hua PENG Zhi-lan WANG He |
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| Affiliation: | Department of Obstetrics and Gynecology, West China Second University Hospital, Chengdu 610041, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PCR clone recombinant |
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