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| 内皮抑制素相互作用蛋白HT036基因的全长克隆及其促血管上皮细胞凋亡的分子机制 | |
| 引用本文： | 范保星,张宝林,孙敬芬,曹璐,陈良安,刘又宁.内皮抑制素相互作用蛋白HT036基因的全长克隆及其促血管上皮细胞凋亡的分子机制[J].中国组织工程研究与临床康复,2006,10(41):66-68. |
| 作者姓名： | 范保星 张宝林 孙敬芬 曹璐 陈良安 刘又宁 |
| 作者单位： | 1. 解放军总医院,呼吸科,北京市,100853 2. 解放军总医院,科研处,北京市,100853 3. 解放军总医院,血液科,北京市,100853 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(30300404,30400198，北京市自然科学基金资助项目(7042057)~~ |
| 摘 要： | 目的:克隆与内皮抑制素(endostatin)相互作用蛋白HT036基因的全长,进一步验证其与内皮抑制素的相互作用,初步阐明其促血管上皮细胞凋亡的分子机制。方法:实验于2004-10/2006-03在解放军总医院呼吸科实验室、军事医学科学院放射医学和生物工程研究所实验室完成。①根据已知HT036的EST序列设计引物,应用RACE技术,从人胎肝cDNA文库获取该基因全长。②采用免疫共沉淀和WesternBlot验证HT036蛋白与内皮抑制素在真核细胞内存在相互作用。③利用真核瞬时表达载体pCDNA3.1( )在EVC304细胞中瞬时表达HT036蛋白,转染了HT036基因的EVC304细胞为试验组(重复两次);没有转染HT036基因的细胞为对照组,用流式细胞仪检测HT036基因对细胞凋亡和细胞周期的影响。结果:①HT036基因全长克隆及生物信息学分析结果:利用RACE技术成功获得HT036基因的全长,并在GENEBANK进行了注册,注册号AY775560。②免疫共沉淀和Western-blot的验证结果:证实HT036蛋白能与内皮抑制素在真核细胞中相互作用。③HT036基因对细胞凋亡和细胞周期的影响:成功构建了表达HT036基因的真核表达载体,两次试验转染ECV304细胞后24h的凋亡率平均为23.63%,而对照组仅为0.10%。结论:获得了一与内皮抑制素相互作用的新的蛋白HT036基因的全长,初步表明HT036参与了内皮抑制素调节的血管生成过程,并对血管上皮细胞具有促进凋亡的作用。 |
| 关 键 词： | 基因 抑制素类 细胞凋亡 |
| 文章编号： | 1671-5926(2006)41-0066-03 |
| 修稿时间： | 2006年7月31日 |
Full-length clone of protein HT036 gene interacting with endostatin and its molecular mechanism in promoting the apoptosis of vascular endothelial cell |
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| Fan Bao-xing,Zhang Bao-lin,Sun Jing-fen,Cao Lu,Chen Liang-an,Liu You-ning.Full-length clone of protein HT036 gene interacting with endostatin and its molecular mechanism in promoting the apoptosis of vascular endothelial cell[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2006,10(41):66-68. | |
| Authors: | Fan Bao-xing Zhang Bao-lin Sun Jing-fen Cao Lu Chen Liang-an Liu You-ning |
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