| 靶向MDR1基因siRNA逆转HepG2/ADM细胞耐药性的研究 |
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| 引用本文： | 贾如江,侯丽艳,冯运章,张贵堂.靶向MDR1基因siRNA逆转HepG2/ADM细胞耐药性的研究[J].河北医科大学学报,2009,30(11). |
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| 作者姓名： | 贾如江 侯丽艳 冯运章 张贵堂 |
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| 作者单位： | 1. 河北省邯郸市中心医院普外二科,河北,邯郸,056002
2. 河北省邯郸市中心医院ICU,河北,邯郸,056002 |
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| 摘 要： | 目的 采用RNA干扰技术逆转人类肝癌细胞系/阿霉素(human hepatocellular liver carcinoma cell line/adriamycin,HepG2/ADM)细胞中多耐药基因,探讨该基因能否有效地抑制多耐药基因(multidrug resistance gene,MDR1)及其编码的糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达,并检测对HepG2/ADM耐药表型的逆转效果.方法 采用药物大剂量冲击法建立HepG2/ADM耐药模型,构建靶向MDR1的小干扰RNA表达载体,并转染到HepG2/ADM细胞中,应用半定量逆转录-聚合酶链反应检测基因转染前后MDR1 mRNA表达水平的变化,Western-blot检测各组细胞P-gp蛋白表达的变化,用噻唑蓝法检测各组细胞对阿霉素、顺铂、长春新碱和氟尿嘧啶等药物的敏感性.结果 HepG2/ADM细胞系不仅对阿霉素耐药,而且对其他化疗药也有抗性,呈现多药耐药特性;重组质粒鉴定结果表明针对MDR1的小干扰RNA表达载体成功构建;与对照组比较,转入细胞后MDR1 mRNA水平明显下降,P-gp蛋白表达明显降低;转入细胞后HepG2/ADM细胞对化疗药物的敏感性明显提高,部分逆转其耐药性.结论 靶向MDR1的小干扰RNA可显著抑制HepG2/ADM细胞中MDR1基因和P-gp蛋白的表达,逆转P-gp介导的HepG2/ADM细胞的耐药性.
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| 关 键 词： | 基因MDR 肝肿瘤 抗药物 肿瘤 |
THE EXPERIMENTAL INVESTIGATION OF MDR1 siRNA REVERSING DRUG-RESISTANCE IN HepG2/ADM CELLS |
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