| 一步法实时荧光定量PCR检测白血病WT1基因mRNA |
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| 引用本文： | 许文娟,徐兵,李冰. 一步法实时荧光定量PCR检测白血病WT1基因mRNA[J]. 南方医科大学学报, 2008, 28(2): 290-292 |
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| 作者姓名： | 许文娟 徐兵 李冰 |
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| 作者单位： | 南方医科大学南方医院血液科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院血液科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院血液科,广东,广州,510515 |
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| 基金项目： | 广东省科技厅科技计划 , 广东省科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建RT-PCR一步法实时荧光定量PCR检测WT1基因mRNA表达的方法,准确定量检测白血病患者微小残留病,指导临床判断预后和早期预测复发.方法 从K562细胞提取的RNA用特异性引物扩增WT1基因,pMD18-T载体克隆法构建荧光定量PCR标准模板,建立RT-PCR一步法实时荧光定量PCR检测wTl基因方法,并对该方法的灵敏度、重复性和稳定性进行检测.结果 构建的RT-PCR一步法实时荧光定量PCR方法的灵敏度达10-4水平:以拷贝数为1.0x106～1.0×102 cps/ml的标准品,分别进行RT-PCR一步法实时荧光定量PCR扩增后,标准品的Ct值与该标准品模板起始浓度的对数存在线性关系,r值达0.998:管间和批间的变异系数均小于8%.结论 所建立RT-PCR一步法实时荧光定量PCR检测WT1基因方法的灵敏度、重复性和特异性好;RT和PCR反应过程一步完成,更简便快捷,减少加样和污染机会,更适合临床检测.
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| 关 键 词： | 聚合酶链反应定量 白血病 WT1基因 |
| 文章编号： | 1673-4254（2008）02-0290-03 |
| 收稿时间： | 2006-05-12 |
| 修稿时间： | 2006-05-12 |
One-step real-time fluorescence quantitative PCR for detecting WT1 mRNA expression in leukemia |
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| XU Wen-juan,XUBing,LI Bing. One-step real-time fluorescence quantitative PCR for detecting WT1 mRNA expression in leukemia[J]. Journal of Southern Medical University, 2008, 28(2): 290-292 |
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| Authors: | XU Wen-juan XUBing LI Bing |
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| Affiliation: | Department of Hematology, Nanfang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China. xuwenjuan5@yahoo.com.cn |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | polymerase chain reaction, quantitative leukemia WT1 gene |
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