他克莫司对白癜风小鼠Th17/Treg细胞平衡及黑素细胞丢失的影响

目的 探究他克莫司对白癜风小鼠辅助性T17（Th17）/调节性T （Treg）细胞平衡和黑素细胞丢失的影响。方法 将小鼠随机分为对照组、模型组和他克莫司低、中、高剂量组（涂抹10、50、100 mg 0.03%他克莫司软膏），使用松香/蜡混合物对小鼠背部相同位置进行去毛，大小为2 cm×2 cm，将其分为两部分：用药区域与非用药区域，面积1：1。除对照组外，于小鼠背部用药区均匀涂抹50 mg 40%莫诺苯宗软膏，每天1次，连续90 d，制备白癜风模型。莫诺苯宗涂抹30 d后开始于相同位置涂抹他克莫司软膏，2种药膏涂抹时间间隔7 h，他克莫司软膏每天早晚各涂抹1次，连续用药60 d。肉眼观察小鼠皮毛脱色情况并进行脱色评分，通过反射式共聚焦显微镜（RCM）观察小鼠皮肤黑素细胞和黑色素的分布，取小鼠皮损进行苏木精-伊红染色（HE）和马松染色（MF）对基底层黑素细胞和含黑色素的毛囊进行计数，通过流式细胞术测定小鼠外周血中Th17和Treg淋巴细胞的比例，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血白细胞介素-17（IL-17）、IL-22和叉头型基因p3（Foxp3）的含量。结果 与对照组比较，白癜风模型组小鼠用药区皮毛明显脱色，脱色评分显著升高（P<0.05），皮损处色素明显缺失；含黑色素的毛囊和黑素细胞显著减少（P<0.05）；Th17/Treg淋巴细胞比例显著升高（P<0.05）；血清IL-17、IL-22水平显著上升，Foxp3水平显著降低（P<0.05）。与模型组比较，他克莫司各组小鼠皮毛脱色情况明显改善，脱色评分显著降低（P<0.05），皮损处可见色素分布及黑素细胞；含黑色素的毛囊和黑素细胞显著增多（P<0.05）；Th17/Treg淋巴细胞比例显著降低（P<0.05）；IL-17、IL-22水平显著降低，Foxp3水平显著升高（均P<0.05）。结论 他克莫司可调控白癜风小鼠Th17/Treg淋巴细胞平衡，抑制其黑素细胞丢失。

Effect of tacrolimus on Th17/Treg cell balance and melanocyte loss in vitiligo mice