神经营养因子3增强脂多糖刺激的人骨髓间充质干细胞的成骨能力

目的探讨神经营养因子3(NT-3)在炎症环境下对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)的保护及促进hBMSC向成骨细胞分化的能力。方法采用脂多糖(LPS)建立细胞炎症模型,未进行任何刺激的hBMSC为炎症对照组;以100 ng/m L人NT-3重组蛋白刺激的hBMSC为NT-3组;若先用100 mmol/L恩波酸吡维铵(PP)作用12 h,再添加100 ng/m L人NT-3重组蛋白刺激者为Wnt抑制剂组,常规条件下培养的hBMSC为正常对照组,每组均进行成骨细胞诱导实验。利用CCK-8法检测hBMSC的增殖情况、异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测hBMSC的凋亡,ELISA检测hBMSC核心结合因子runt相关转录因子2(RUNX2)、碱性磷酸酶(ALP)含量、茜素红染色检测钙结节形成情况。结果与炎症对照组相比,NT-3组的hBMSC增殖活性明显增强,细胞凋亡显著降低,且NT-3组的RUNX2、ALP等蛋白含量或茜素红染色强度均明显增加。与NT-3组相比,Wnt抑制剂组的hBMSC增殖活性降低,细胞凋亡增加,RUNX2、ALP等蛋白含量或茜素红染色强度均明显降低。结论 NT-3具有保护hBMSC抗炎症损伤的作用,并促进hBMSC向成骨细胞分化。