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人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65重组抗原酶联免疫吸附法的建立与两种方法的比较分析
引用本文:类延花,王明丽. 人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65重组抗原酶联免疫吸附法的建立与两种方法的比较分析[J]. 中华检验医学杂志, 2005, 28(6): 599-601
作者姓名:类延花  王明丽
作者单位:230032,合肥,安徽医科大学微生物学教研室
基金项目:教育部科学技术重点项目(01052),安徽省生物医药重大科技专项项目(01303003)
摘    要:目的用我们研制的一种新人巨细胞病毒(HCMV)重组被膜磷蛋白pp65为抗原,建立快速、简便和特异的检测HCMVIgM的间接酶联免疫吸附法(REC—EL.ISA)。方法用自行设计、表达的新的HCMV pp65重组抗原,建立REC—ELISA,并检测100份临床疑似为HCMV感染者血清中HCMV—IgM,同时与全病毒为抗原的间接ELISA法(简称全病毒一ELISA法)和美国BioCheck试剂盒(简称BioCheck法)检测结果进行比较。结果REC—ELISA法重组抗原最适量为3.5μg/孔,HRP标记二抗为1:800,血清稀释度为1:100;稳定性试验阳性变异系数(CV)为9.5%,重复性试验平均CV值:批内CV 4.5%,批间CV 9.6%。REC—ELISA法、全病毒-ELISA法和BioCheck法检测HCMV IgM的阳性率分别为44%、50%和45%;REC—ELISA法的敏感性为95.6%,其特异性(98.2%)高于全病毒-ELISA法(90.9%);正确指数为92.8%,与BioCheck法一致性为97.0%。结论用pp65重组抗原建立的REC—ELISA法具有高度特异性与敏感性,且操作简单、快速,重复性好;与全病毒抗原相比,重组抗原可规模化、标准化生产,且更安全、经济,具有良好的临床应用前景。

关 键 词:人巨细胞病毒 重组抗原 被膜磷蛋白 pp65 比较分析 间接酶联免疫吸附法 间接ELISA法 变异系数(CV) HCMV 临床应用前景 血清稀释度 稳定性试验 重复性试验 全病毒抗原 标准化生产 自行设计 检测结果 正确指数 IgM 敏感性
修稿时间:2004-08-31

Establishment of ELISA method of detecting human cytomegalovirus by use of recombinant antigen pp65 and the comparative analysis with two other methods
LEI Yan-hua,WANG Ming-li. Establishment of ELISA method of detecting human cytomegalovirus by use of recombinant antigen pp65 and the comparative analysis with two other methods[J]. Chinese Journal of Laboratory Medicine, 2005, 28(6): 599-601
Authors:LEI Yan-hua  WANG Ming-li
Abstract:
Keywords:Human cytomegalovirus  IgM antibodies  pp65 recombinant antigen  Enzyme-linked immunosorbent assay
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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