TGF-β1 对肌成纤维细胞MMP-2激活的影响

目的：观察转化生长因子β1(TGF-β1)对鼠肌成纤维细胞（C2C12细胞）分泌基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其激活的影响，探讨其内在机制。 方法：用不同浓度的TGF-β1（0、1、5、10 μg/L）干预C2C12细胞24 h，200 pmol/L Smad3基因短干扰RNA（siRNA-Smad3）转染C2C12细胞24 h，用ELISA 方法测定MMP-2及其活性型MMP-2。结果：(1) 0、1、5、10 μg/L TGF-β1干预C2C12细胞24 h，ELISA检测总MMP-2的结果（μg/L）分别为177±20、180±15、171±18、179±28，方差分析无显著差异(P>0.05)；活性型MMP-2分别为23.09±4.37、14.42±2.30、9.50±1.18、4.48±0.69，比较差异显著(P<0.01)。(2) 5 μg/L TGF-β1干预C2C12细胞4 h、12 h和24 h，总MMP-2 ELISA值分别为160±16(对照组)/157±17（干预组）、174±6/174±16、187±12/189±18, 不同时点干预组总MMP-2 值比较无差异，P>0.05；活性型MMP-2 值分别为：16.92±1.26(对照组) /16.53±2.56（干预组）、22.70±3.03/8.00±2.02、23.15±2.66/9.39±2.60,干预组活性型MMP-2值比较有差异，P<0.01。（3）200 pmol/L siRNA-Smad3转染C2C12细胞24 h，再用5 μg/L TGF-β1干预C2C12细胞24 h, 活性型MMP-2值分别是20.80±1.53（siRNA-control，空白对照组)、9.82±2.18（siRNA-control+5 μg/L TGF-β1，内对照组）、20.09±2.27（siRNA-Smad3+5 μg/L TGF-β1，实验组）；实验组和内对照组比较差异显著（P<0.01)，实验组和空白对照组比较无显著差异（P>0.05)。结论：TGF-β1并不影响C2C12细胞分泌MMP2，但显著抑制MMP-2的活化；siRNA-Smad3阻断Smad3信号转导可以消除TGF-β1对MMP-2活化的抑制作用。