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噬菌体抗体库的构建及人源抗内毒素类脂A抗体的筛选
引用本文:韩晓芳,王希良,郭力军,冯笑梅,赵建平,杜英,高玉明. 噬菌体抗体库的构建及人源抗内毒素类脂A抗体的筛选[J]. 中华传染病杂志, 2001, 19(4): 236-239
作者姓名:韩晓芳  王希良  郭力军  冯笑梅  赵建平  杜英  高玉明
作者单位:1. 内蒙古自治区医院,
2. 重庆第三军医大学全军免疫研究所
基金项目:内蒙古自然科学基金资助项目(9713033)
摘    要:目的寻找一种治疗内毒素血症及其并发症较为有效的途径.方法从感染革兰阴性杆菌J7患者体内含有内毒素类脂A抗体的淋巴细胞中提取mRNA,经反转录再从IgG重链Fd两端及轻链通用引物分别扩增Fab基因片段,依次插入到噬菌体载体pCOMR3中,电穿孔转入大肠杆菌XL-blue,经辅助病毒VCSM13感染,重组噬菌体溶源裂解.结果Fab抗体表达于噬菌体CPⅢ的N端,噬菌体抗体库的容量为4.8×106,筛选出抗内毒素类脂A抗体,经LPS蛋白对噬菌体抗体库进行3轮淘选,使抗内毒素类脂A的特异性抗体得到100倍的富集.结论通过直接和竞争ELISA实验筛选出3株结合活性好的特异性抗体,为下一步应用研究奠定了基础.

关 键 词:噬菌体抗体库 内毒素 Fab抗体 脓毒血症 内毒素血症
修稿时间:2000-03-05

Study of anti-lipid A antibodies of bacterial endotoxin from phage antibody library
HAN Xiaofang,WANG Xiliang,GUO Lijun,et al.. Study of anti-lipid A antibodies of bacterial endotoxin from phage antibody library[J]. Chinese Journal of Infectious Diseases, 2001, 19(4): 236-239
Authors:HAN Xiaofang  WANG Xiliang  GUO Lijun  et al.
Affiliation:HAN Xiaofang,WANG Xiliang,GUO Lijun,et al. Inner Mongolia Autonomous Region Hospital,Huhehot 010017,China
Abstract:
Keywords:Phage antibody library  Endotoxin  Fab antibody
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