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鸡MxA基因的克隆、表达及生物学活性检测
引用本文:陈蕾,江国托,常维山.鸡MxA基因的克隆、表达及生物学活性检测[J].中国免疫学杂志,2006,22(11):1018-1020,1024.
作者姓名:陈蕾  江国托  常维山
作者单位:1. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018
2. 大连三仪生物工程研究所,大连,116036
基金项目:山东农业大学校科研和教改项目
摘    要:目的:克隆鸡MxA基因,构建其原核表达质粒,并诱导其在大肠杆菌中表达融合蛋白。方法:采用RT-PCR方法从鸡成纤维细胞(CEF)中扩增MxA,将其克隆至克隆载体pMD18-T中,筛选阳性克隆后回收目的片段,将其克隆人原核表达质粒pGEX-6p—1,构建其重组表达质粒pGEX—MxA,以IPTG诱导表达,经SDS—PAGE、鸡胚新城疫病毒干扰试验和VSV-CEF微量细胞抑制试验进行分析、鉴定。结果:经RT—PCR扩增获得的MxA序列与GeneBank报道的序列一致,SDS—PAGE和干扰试验证实重组质粒可以表达出相应分子量为45000的蛋白,与GST—MxA融合蛋白分子量一致。结论:成功完成了鸡MxA基因的克隆及其原核表达质粒的构建,在大肠杆菌DIL5ct中经IPTG诱导表达了融合蛋白GST—MxA,为进一步探讨MxA的生物学活性,探索抗病毒药物的研发奠定了基础。

关 键 词:鸡MxA基因  基因克隆  原核表达  生物活性
文章编号:1000-484X(2006)11-1018-04
收稿时间:2005-10-29
修稿时间:2005-10-292006-06-09

Cloning and expression of MxA gene from chickens in E.coli and identification of biological activity of MxA
CHEN Lei,JIANG Guo-Tuo,CHANG Wei-Shan.Cloning and expression of MxA gene from chickens in E.coli and identification of biological activity of MxA[J].Chinese Journal of Immunology,2006,22(11):1018-1020,1024.
Authors:CHEN Lei  JIANG Guo-Tuo  CHANG Wei-Shan
Abstract:
Keywords:Chickens MxA gene  Gene clone  Protein expression  Biological activity
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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