| 组蛋白变异体macroH2A1真核表达载体构建及其细胞内定位的研究 |
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| 引用本文： | 张菁,罗海华,王娟,卢康荣,姜勇. 组蛋白变异体macroH2A1真核表达载体构建及其细胞内定位的研究[J]. 热带医学杂志, 2012, 12(5): 506-509,492 |
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| 作者姓名： | 张菁 罗海华 王娟 卢康荣 姜勇 |
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| 作者单位： | 南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室,广东广州,510515 |
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| 基金项目： | 教育部长江学者和创新团队发展计划项目(IRT0731);国家自然科学基金(81030055);广东省自然科学基金(10251051501000003、S2011010003917) |
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| 摘 要： | 目的构建带有血凝素(HA)标签的小鼠组蛋白变异体macroH2A1(mH2A1)的真核表达载体,并观察其在人胚肾293T细胞中的表达定位情况。方法提取内毒素休克的BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应获得内毒素休克小鼠肝脏组织的cDNA,以cDNA为模板使用PCR方法扩增得到mH2A1编码序列,并将其酶切后连接至带有HA标记的载体pcDNA3-HA上;对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定。随后将重组质粒瞬时转染293T细胞,利用荧光显微镜观察。结果 PCR、双酶切和测序鉴定表明pcDNA3-mH2A1-HA真核表达质粒构建正确;经转染实验发现,该质粒能够在293T细胞中表达,表达产物主要定位在细胞核中。结论 mH2A1真核表达载体pcDNA3-mH2A1-HA的成功构建及明确其在哺乳动物细胞中的具体核定位,为进一步研究mH2A1作用细胞的信号通路提供了一个重要的工具。
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| 关 键 词： | 组蛋白变异体macroH2A1 血凝素类 细胞内定位 载体构建 |
The construction of eukaryotic expression vector and localization of core histone macro-H2A.1 in the cells |
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| ZHANG Jing , LUO Hai-hua , WANG Juan , LU Kang-rong , JIANG Yong. The construction of eukaryotic expression vector and localization of core histone macro-H2A.1 in the cells[J]. Journal Of Tropical Medicine, 2012, 12(5): 506-509,492 |
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| Authors: | ZHANG Jing LUO Hai-hua WANG Juan LU Kang-rong JIANG Yong |
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| Affiliation: | (Department of Pathophysiology,Key Laboratory of Proteomics of Guangdong,Guangzhou 510515,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | core histone macro-H2A.1 hemagglutinin intracellular localization vector construction |
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