抗EGFRvⅢ/EGFR单抗9B9的制备和鉴定

目的：制备抗EGFRvⅢ/EGFR单克隆抗体，并探讨其对人肝癌细胞株Huh7EGFRvⅢ和表皮癌细胞系A431裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法：将稳转细胞株3T3 EGFRvⅢ免疫BALB/c小鼠，免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，ELISA法筛选出EGFRvⅢ阳性的克隆株并命名为9B9。Western blotting和免疫荧光鉴定9B9抗体与EGFRvⅢ/EGFR抗原结合的特性。建立裸鼠人肝细胞癌和表皮细胞癌移植瘤模型，分别腹腔注射PBS、西妥昔单抗和9B9抗体，比较它们对各移植瘤模型的抑瘤效果。结果：通过杂交瘤制备单克隆抗体技术筛选获得一株单抗9B9，Western blotting和免疫荧光结果显示其既能识别EGFRvⅢ又能识别EGFR。9B9抗体和西妥昔单抗对人肝癌细胞Huh7EGFRvⅢ移植瘤的抑瘤率分别46%和42%，对人表皮细胞癌移植瘤的抑瘤率分别为86%和85%。结论:制备获得的单克隆抗体9B9可显著抑制裸鼠人肝细胞癌以及表皮细胞癌移植瘤的生长，具有与西妥昔单抗相似的抑瘤效果。