-80℃非程控冷冻保存人外周血干细胞的效果观察

目的 探讨-80℃非程控冷冻保存人外周血干细胞(PBSC)的效果.方法 41份PBSC标本,39份采自恶性肿瘤患者,2份采自正常供者.对于恶性肿瘤患者,干细胞采集前采用针对性化疗方案联合粒细胞集落刺激因子或粒-单细胞集落刺激因子进行动员.将采集的干细胞与采用120 g/L羟乙基淀粉、体积分数为10%二甲基亚砜及80 g/L人血清白蛋白组成的冷冻保护剂按1:1混合,然后将其直接放入-80℃低温冰箱内保存.测定保存前以及保存后不同时间的单个核细胞(MNC)、有核细胞(NC)、CD34+细胞、粒一单核细胞系集落形成单位(CFU-GM)和红系爆式集落形成单位(BFU-E)等的回收率以及细胞的台盼蓝拒染率.结果 经-80℃非程控直接冷冻保存1个月至10年,PBSC的台盼蓝拒染率、NC和MNC回收率的变化较小(P>0.05),而CD34+细胞、CFU-GM和BFU-E回收率在冻存5～10年后下降较明显(P＜0.05),但仍分别达89.6%、85.1%和83.7%.34例患者经相应处理后,回输经-80℃下保存13～53 d(平均19 d)的干细胞,患者于细胞回输后11～27 d(平均14.7 d)获得造血功能重建.结论 在采用终浓度为60 g/L 羟乙基淀粉、体积分数为5%二甲基亚砜及40 g/L人血清白蛋白组成的冷冻保护剂的情况下,-80℃非程控冷冻法适于PBSC的长期保存,效果较理想.