摘 要: | 目的 探讨NKD1调控Wnt/β-catenin信号通路影响结直肠肿瘤细胞周期的作用机制。方法 利用免疫组化和RT-PCR方法,检测NKD1在结直肠肿瘤癌组织和癌旁组织中的表达。选择人结直肠癌细胞SW620和HT29,分别转染NKD1干扰(NKD1 siRNA)慢病毒载体,RT-PCR和Western blot检测转染效果;定量蛋白质组学联合生信分析筛选NKD1富集的生物学功能及信号通路;CCK8、平板克隆实验检测NKD1对细胞增殖能力的影响;RT-PCR和Western blot检测NKD1对细胞周期标志物表达的影响;Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路核心分子的蛋白表达。结果 NKD1在结直肠癌组织中表达高于癌旁组织(P<0.05);下调NKD1导致SW620和HT29细胞中NKD1 mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05);定量蛋白质组学联合生信分析显示,下调NKD1差异蛋白主要富集细胞增殖和细胞周期生物过程,且显著富集细胞周期信号通路;相比对照组(Control组和NC组),siNKD1组SW620和HT29细胞增殖能力明显下降(P&l...
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