| 维生素D受体野生型及FokⅠ突变型真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 李宝群,梅爱敏,左彥珍.维生素D受体野生型及FokⅠ突变型真核表达载体的构建[J].实用医学杂志,2011,27(7). |
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| 作者姓名： | 李宝群 梅爱敏 左彥珍 |
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| 作者单位： | 承德医学院药理教研室,067000 |
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| 基金项目： | 河北省教育厅科学研究计划项目，承德市科学技术研究与发展指导计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:克隆人维生素D受体(VDR)全长,构建VDR野生型及FokⅠ突变型重组真核表达质粒.方法:提取总RNA,RT-PCR方法扩增将产物用EcoRⅠ和Hind Ⅲ进行双酶切后与pcDNA3.1(-) B-myc/his载体连接形成重组载体;对野生型VDR基因行定点诱变,构建突变型FokⅠ VDR质粒.结果:重组质粒被酶切为两条带,一条为1 300 bp(代表人VDR),一条为5 500 bp(空载体);片段大小与理论值相符.测序结果与Genbank序列完全相同.结论:成功克隆了人VDR基因全长并成功构建了人野生型和突变型FokⅠVDR重组真核表达载体pcDNA3.1(-)B-myc/his hVDR,为进一步研究VDR基因变异与相关肿瘤易感性的分子机制奠定了实验基础.
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| 关 键 词： | 受体 骨化三醇 真核表达载体 |
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