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精子蛋白sp32/OY-TES-1mRNA及其蛋白在正常组织表达的探讨
引用本文:范蓉,余良,肖绍文,何少健,罗彬,黄绍明,罗国容,谢小薰.精子蛋白sp32/OY-TES-1mRNA及其蛋白在正常组织表达的探讨[J].解剖学报,2007,38(6):675-680.
作者姓名:范蓉  余良  肖绍文  何少健  罗彬  黄绍明  罗国容  谢小薰
作者单位:广西医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室,南宁,530021;广西医科大学第一临床医院神经外科,南宁,530021;广西医科大学基础医学院解剖学教研室,南宁,530021
基金项目:国家自然科学基金 , 广西新世纪十百千人才工程基金 , 高等学校博士学科点专项科研项目 , 广西研究生科研创新项目
摘    要:目的 了解正常组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的表达量是否存在差异以及该蛋白的表达情况,为sp32/OY-TES-1表达谱增加更多信息.方法 提取40例(19种)正常组织总RNA,逆转录-聚合酶合成cDNA,普通PCR检测cDNA质量;构建目的 基因sp32/OY-FES-1及看家基因HPRT质粒,制备标准品,绘制标准曲线,建立实时定量PCR(TaqMan)方法和优化反应体系,检测组织中sp32/OY-TES-1和HPRT的表达,sp32/OY-TES-1mRNA的表达量以OY-TES-1/HPRT表示.通过制备的OY-TES-1多克隆抗体,结合免疫组织化学检测sp32/OY-TES-1蛋白在多种正常组织中的表达.结果 正常组织中sp32/OY-TES-1mRNA阳性率为72.50%(29/40);2.非睾丸正常组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的相对表达量值(目的 基因/看家基因)为0.000 1~0.495 0,呈对数正态分布;3.睾丸组织中sp32/OY-TES-1 mRNA的相对表达量为44.9,是其他正常组织的91~1 000倍;4.免疫组织化学(IHC)显示在所检测的多种正常组织和细胞中(10例睾丸组织、8例结肠、7例肝、6例骨骼肌、5例胃、5例晶状体、4例精子、3例外周血白细胞和1例肾),除4例精子和1例肾组织中的肾小管外,其余均未见OY-TES-1蛋白阳性反应.结论 sp32/OY-TES-1 mRNA广泛地表达在各种正常组织,表达量因组织不同而异;睾丸组织是所检测的正常组织中其mRNA表达量最高的组织.而sp32/OY-TES-1蛋白比其mRNA更具有限制性表达的特点.

关 键 词:癌-睾丸抗原  精子蛋白  基因表达  定量PCR  免疫组织化学  
收稿时间:2006-08-18
修稿时间:2007-07-16

THE STUDY OF SPERM PROTEIN sp32/OY-TES-1 mRNA AND PROTEIN EXPRESSION IN HUMAN NORMAL TISSUES
FAN Rong,YU Liang,XIAO Shao-wen,HE Shao-jian,LUO Bin,HUANG Shao-ming,LUO Guo-rong,XIE Xiao-xun.THE STUDY OF SPERM PROTEIN sp32/OY-TES-1 mRNA AND PROTEIN EXPRESSION IN HUMAN NORMAL TISSUES[J].Acta Anatomica Sinica,2007,38(6):675-680.
Authors:FAN Rong  YU Liang  XIAO Shao-wen  HE Shao-jian  LUO Bin  HUANG Shao-ming  LUO Guo-rong  XIE Xiao-xun
Institution:1Department of Histology and Embryology in Guangxi Medical University, Nan′ning 530021,China;2Department of Neurosurgery in the first Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Nan′ning 530021,China;3Department of Anatomy in Guangxi Medical University, Nan′ning 530021,China
Abstract:
Keywords:Cancer-testis antigen  Sperm protein  Gene expression  Quantitative real-time PCR Immunohistochemistry  Human
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