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靶向性非病毒载体K16GRGDSPC寡肽的合成及转染骨髓基质干细胞的研究
引用本文:郭晓东,潘海涛,郑启新,杨述华,邵增务,刘勇,李长文,宋玉林,袁泉. 靶向性非病毒载体K16GRGDSPC寡肽的合成及转染骨髓基质干细胞的研究[J]. 中华实验外科杂志, 2006, 23(9): 1103-1105
作者姓名:郭晓东  潘海涛  郑启新  杨述华  邵增务  刘勇  李长文  宋玉林  袁泉
作者单位:430022,武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科
摘    要:目的设计合成新型靶向性非病毒载体K16GRGDSPC寡肽,探讨其作为载体介导外源基因转染骨髓基质干细胞(BMSCs)的可行性。方法用固相合成法合成K16GRGDSPC并用质谱仪和高压液相色谱仪进行检测。以其作为载体转染增强型绿色荧光蛋白质粒pcDNA3-EGFP并计数转染效率;转染转化生长因子(TGF)-β1质粒pcDNA3-TGF-β1并通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和TGF-β1敏感细胞株水貂肺上皮细胞(MV1)生长抑制法检测目的基因TGF-β1稳定表达情况及表达产物的生物学活性。结果质谱图显示合成肽的平均分子量为2741.3307 m/z,与理论上计算的平均分子量一致。高压液相色谱仪示合成肽的纯度为94%~95%,满足试验需求。以K16GRGDSPC寡肽为载体转染BMSCs的效率为(18.6±2.1)%,与脂质体(Lipofectamine)介导转染的效率(19.3±2.3)%差异无统计学意义(P>0.05);转染TGF-β1基因阳性细胞克隆经RT- PCR扩增有特异性产物,TGF-β1敏感细胞株MV1的增殖受到明显抑制,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论所合成的肽是设计的K16GRGDSPC寡肽,以其为载体介导外源基因转染BMSCS是确实可行的,为下一步构建载基因仿生基质材料奠定了基础。

关 键 词:非病毒载体 肽类 基因表达 骨髓基质干细胞
收稿时间:2005-11-21
修稿时间:2005-11-21

Synthesis of a novel targeted-nonviral vector K16GRGDSPC oligopeptide and gene delivery to bone mar-row stromal cells mediated by the peptide
GUO Xiao-dong PAN Hai-tao ZHENG Qi-xin. Synthesis of a novel targeted-nonviral vector K16GRGDSPC oligopeptide and gene delivery to bone mar-row stromal cells mediated by the peptide[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2006, 23(9): 1103-1105
Authors:GUO Xiao-dong PAN Hai-tao ZHENG Qi-xin
Affiliation:GUO Xiao-dong PAN Hai-tao ZHENG Qi-xin Department of Orthopedics,Union Hospital,Tongji Medical College,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430022,China
Abstract:
Keywords:Nonviral vector   Peptide   Gene expression   Bone marrow stromal cell
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