| 大鼠白细胞介素10(IL-10)cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 陈家存,畅继武,马腾骧.大鼠白细胞介素10(IL-10)cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达[J].中国免疫学杂志,2002,18(7):461-463. |
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| 作者姓名： | 陈家存 畅继武 马腾骧 |
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| 作者单位： | 1. 徐州医学院附属医院泌尿外科,徐州,221002
2. 天津泌尿外科研究所,天津,300211 |
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| 摘 要： | 目的:克隆大鼠白细胞介素10（IL-10）cDNA的全长序列,并使其在大肠杆菌中表达,为其分子生物学利用奠定基础。方法:无菌条件下切取大鼠的脾脏,收获脾细胞,用LPS刺激培养4h;提取细胞的总RNA,用RT-PCR技术克隆IL-10cDNA的全长序列;经测序后将IL-10cDNA插入表达载体 pJW2,转染 DH5α细胞后进行热诱导表达并对表达蛋白进行测定。结果:脾细胞经LPS刺激后IL-10转录水平增加,从提取的RNA易反转录并扩增出期望的PCR产物,测序结果表明得到的IL-10CDNA序列与基因库报告的序列完全一致。将其插入表达载体pJW2后经热诱导顺利表达出蛋白分子量与文献报道一致。Western-blot分析表明表达的条带可与小鼠抗大鼠IL-10抗体特异性结合。结论:大鼠的IL-10cDNA全长序列被成功克隆,克隆序列能够在大肠杆菌中表达。
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| 关 键 词： | 白细胞介素-10 cDNA 克隆 表达 大肠杆菌 |
| 文章编号： | 1000-484X(2002)07-0461-03 |
Molecular cloning and expression of rat IL-10cDNA |
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| CHEN Jia-Cun.Molecular cloning and expression of rat IL-10cDNA[J].Chinese Journal of Immunology,2002,18(7):461-463. |
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| Authors: | CHEN Jia-Cun |
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| Institution: | CHEN Jia-Cun. Department of Urology,the Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College,Xuzhou 221002 CHANG Ji-Wu,MA Teng-Xiang . Tianjin Research Institute of Urology,Tianjin 300211 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Interleukine10 cDNA Cloning Expression E coli |
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