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miR-128-3p靶向TCF4抑制黑色素瘤A375细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化
摘    要:目的:探究微小RNA-128-3p(miR-128-3p)对人黑色素瘤A375细胞增殖、侵袭和上皮-间充质转化的作用及其机制。方法:用miR-128 mimic和/或转录因子4(TCF4)表达质粒pcDNA-TCF4(pc-TCF4)转染A375细胞,RT-qPCR检测miR-128-3p的表达,Western blot法检测TCF4的表达,萤光素酶报告实验证明miR-128-3p和TCF4的靶向关系;Transwell检测细胞的侵袭能力;Western blot法检测上皮标志蛋白E-cadherin和间充质标志蛋白vimentin的表达及TCF4下游靶分子cyclin D和c-Myc的蛋白表达水平。结果:过表达miR-128-3p能显著抑制TCF4的表达(P0.01),而转染pc-TCF4能明显减弱miR-128-3p对TCF4表达的抑制作用,miR-128-3p能显著减弱TCF4野生型质粒的萤光素酶活性(P0.01);miR-128-3p能显著抑制A375细胞增殖(P0.01),显著减少侵袭细胞数(P0.01);除此之外,miR-128-3p还能显著降低vimentin、cyclin D和c-Myc的表达水平(P0.01),显著升高E-cadherin(P0.01)的表达水平。结论:miR-128-3p能抑制黑色素瘤A375细胞的增殖、侵袭和上皮-间充质转化,作用机制与靶向TCF4及抑制其下游靶基因的表达有关。

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