| 两步PCR法检测细胞培养物中支原体污染的初步结果 |
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| 引用本文： | 魏红梅,袁曾麟.两步PCR法检测细胞培养物中支原体污染的初步结果[J].中华微生物学和免疫学杂志,1994,14(2):131-134. |
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| 作者姓名： | 魏红梅 袁曾麟 |
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| 作者单位： | 中国药品生物制品检定所 |
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| 摘 要： | 本文报道用两步ＰＣＲ法快速检测细胞培养物中污染的支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ）。两套引物选自１６ＳｒＲＮＡ和２３ＳｒＲＮＡ保守区域，外部引物ＰＦ１，ＰＲ１扩增的ＤＮＡ片段在３６０～５００ｂｐ之间，内部引物ＰＦ２，ＰＲ２扩增的ＤＮＡ片段在１４０～２２０ｂｐ之间。试验表明，两步ＰＣＲ法能检出污染细胞培养物七种常见的支原体。１７份待检细胞培养物，两步ＰＣＲ法检测，９份（５２．９％）为阳性，直接培养法检测，５份（２９．４％）为阳性。采用快速热循仪，使ＰＣＲ反应时间大大缩短，３０次循环仅需２０分钟。反应液的用量也仅１０μｌ，提高了检测效率，节省了材料，降低了试验用费。本文就两步ＰＣＲ的灵敏度等特性也作了初步测试。
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| 关 键 词： | 两步PCR法，共同引物，支原体，细胞培养物 |
DETECTION OF MYCOPLASMAS IN CELL CULTURES BY USING TWO-STEP POLYMERASE
CHAIN REACTION |
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| Wei Hong -mei Yuan Zeng -lin Chen Tian -shou.DETECTION OF MYCOPLASMAS IN CELL CULTURES BY USING TWO-STEP POLYMERASE
CHAIN REACTION[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,1994,14(2):131-134. |
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| Authors: | Wei Hong -mei Yuan Zeng -lin Chen Tian -shou |
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| Keywords: | Two-step PCR Universal primers Mycoplasma Cell cultures |
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