| 单纯疱疹病毒2型多表位复合DNA疫苗的构建与免疫原性 |
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| 引用本文： | 徐金华,许炎,郑志忠,夏天,王健,梁俊,张臻,朱小华,朱乃硕.单纯疱疹病毒2型多表位复合DNA疫苗的构建与免疫原性[J].中华传染病杂志,2008,26(2). |
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| 作者姓名： | 徐金华 许炎 郑志忠 夏天 王健 梁俊 张臻 朱小华 朱乃硕 |
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| 作者单位： | 1. 复旦大学附属华山医院皮肤科,上海,200040
2. 复旦大学生命科学学院病毒与分子免疫学研究室 |
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| 摘 要： | 目的 构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白gD、gB、gC和早期表达蛋白ICP27的多表位复合DNA疫苗,探讨其诱导机体免疫应答的能力.方法 将HSV-2野生株经PCR鉴定后,利用PCR技术从其基因组扩增出HSV-2 ICP27 377-459、gD146-179、gD223-306、gB529-606、gC247-282和gD1-77等6个基因片段.采用多基冈片段一步酶切连接法获得构建的6个片段的复合DNA疫苗(HV)融合基冈片段,经pGEMT载体克隆后,定向插入真核表达质粒pcDNA3.1载体中,构建重组真核表达质粒HV-pcDNA3.1,并对其进行酶切分析及测序鉴定.10只C57/BL6小鼠均分为脂质体包裹pcDNA3.1空载体质粒对照组和脂质体包裹HV-pcDNA3.1质粒免疫组.ELISA检测小鼠血清HSV-2特异性IgG、IL-2和IFN-γ,乳酸脱氢酶法检测CTL功能.数据行t检验.结果 酶切重组质粒HV-pcDNA3.1,电泳可见两条带,分别为融合基因HV(1.3 kb)和线性质粒pcDNA3.1(5.4 kb).测序结果表明,克隆基因插入方向正确,与基因库HSV-2相关序列同源性达99.9%.与pcDNA3.1空载体质粒组相比,HV-pcDNA3.1免疫组小鼠血清中HSV-2特异性IgG(0.29±0.14比0.11±0.04,P＜0.05)、IL-2(1 246.8±157.0比685.2±104.2,P＜0.05)和IFN-γ(1 340.3±108.5比547.7±189.3,P＜0.05)表达明显增加,CTL活性增强(31.82±10.12比8.30±2.91,P＜0.05).结论 成功构建了HSV-2糖蛋白gD、gB、gC和早期表达蛋白ICP27的多表位复合DNA疫苗,能有效引起小鼠机体特异性体液免疫和细胞免疫应答.
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| 关 键 词： | 疱疹病毒2型 人 疫苗 DNA 糖蛋白类 感染细胞蛋白27 |
Construction and immunogenicity of multiple epitope DNA vaccine against herpes simplex virus type 2 |
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| XU Jin-hua,XU Yan,ZHENG Zhi-zhong,XIA Tian,WANG Jian,LIANG Jun,ZHANG Zhen,ZHU Xiao-hua,ZHU Nai-shuo.Construction and immunogenicity of multiple epitope DNA vaccine against herpes simplex virus type 2[J].Chinese Journal of Infectious Diseases,2008,26(2). |
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| Authors: | XU Jin-hua XU Yan ZHENG Zhi-zhong XIA Tian WANG Jian LIANG Jun ZHANG Zhen ZHU Xiao-hua ZHU Nai-shuo |
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