| 人Ⅰ型前胶原基因反义寡核苷酸抑制增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成 |
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| 引用本文： | 袁即山,利天增,祁少海. 人Ⅰ型前胶原基因反义寡核苷酸抑制增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成[J]. 中国修复重建外科杂志, 2009, 23(6) |
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| 作者姓名： | 袁即山 利天增 祁少海 |
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| 作者单位： | 袁即山,YUAN Jishan(江苏大学附属人民医院骨科,江苏镇江,212002);利天增,祁少海,LI Tianzeng,QI Shaohai(中山大学附属第一医院烧伤科) |
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| 基金项目： | 广东省重点科研项目，广东省医学科研联合攻关资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨阳离子脂质体介导Ⅰ型前胶原基因(Col Ⅰ A1)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxyneucleotide,ASODN)转染对人增生性瘢痕成纤维细胞Col Ⅰ A1表达的影响.方法 取患者自愿捐赠瘢痕组织,采用组织块法培养人增生性瘢痕成纤维细胞并传代.于6孔板内按32.25×104个/孔的密度接种第4代细胞,根据转染液不同分为4组:A组为脂质体加Col Ⅰ A1 ASODN,B组为Col Ⅰ A1 ASODN,C组为脂质体,D组为空白对照.转染后8 h,1、2、3、4 d分别提取细胞总RNA,行RT-PCR后测定Col Ⅰ A1 mRNA表达量;胃酶消化法提取ECM中Col Ⅰ A1蛋白,ELISA测定其浓度.结果 扩增产物经琼脂糖凝胶电泳榆测显示条带清晰,无杂带、明显的引物二聚体及拖尾现象.Col Ⅰ A1 mRNA相对表达量:转染后8 h,A组小于B、C、D组,B、C组小于D组,比较差异均有统计学意义(P＜0.05);B、C组间比较筹异无统计学意义(P＞0.05);转染后1 d,A、B组小于C、D组(P＜0.05),A、B组间和C、D组间比较差异无统计学意义(P＞0.05):转染后2 d,各组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05);转染后3、4 d,A组小于B、C、D组,B组小于C、D组(P＜0.05),C、D组间差异无统计学意义(P＞0.05).Col Ⅰ蛋白浓度:转染后8 h,A组小于B、C、D组,B、C组小于D组,比较差异均有统计学意义(P＜0.05),B、C组间差异无统计学意义(P＞0.05);转染后1 d,各组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05);转染后2、3、4 d,A、B组小于C、D组,C组小于D组(P＜0.05),A,B组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Col Ⅰ A1 ASODN抑制Col Ⅰ A1 mRNA和蛋白表达;阳离子脂质体作为载体有增强效果,促进ASODN进入细胞并在核内分布.
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| 关 键 词： | I型前胶原基因 反义寡核苷酸 增生性瘢痕 胶原 |
INHIBITORY EFFECT OF HUMAN COL 1 A1 ANTISENSE OLIGODEOXYNEUCLEOTIDE ON COLLAGEN SYNTHESIS IN HYPERTROPHIC SCAR FIBROBLASTS |
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| YUAN Jishan,LI Tianzeng,QI Shaohai. INHIBITORY EFFECT OF HUMAN COL 1 A1 ANTISENSE OLIGODEOXYNEUCLEOTIDE ON COLLAGEN SYNTHESIS IN HYPERTROPHIC SCAR FIBROBLASTS[J]. Chinese journal of reparative and reconstructive surgery, 2009, 23(6) |
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| Authors: | YUAN Jishan LI Tianzeng QI Shaohai |
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