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| ndr2基因在肺腺癌细胞GLC-82中的诱导表达 | |
| 引用本文： | 李树钧,王华,戚好文,张健,何鹏,张文红,季少平,刘新平,药立波. ndr2基因在肺腺癌细胞GLC-82中的诱导表达[J]. 医学争鸣, 2002, 23(13): 1209-1213 |
| 作者姓名： | 李树钧 王华 戚好文 张健 何鹏 张文红 季少平 刘新平 药立波 |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033；第四军医大学西京医院呼吸内科,陕西,西安,710033 2. 第四军医大学西京医院超声诊断科,陕西,西安,710033 3. 第四军医大学西京医院呼吸内科,陕西,西安,710033 4. 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710033 |
| 基金项目： | 国家杰出青年科学基金资助 (3 982 5 113 )，国家重点基础研究发展规划 (973 )项目资助 (J19990 75 6 |
| 摘 要： | 目的 构建蜕皮素诱导的抑癌基因ndr2哺乳动物真核表达载体（pIND-ndr2)，转染肺腺癌细胞GLC－82，观察ndr2基因表达，为进一步研究ndr2的生物学功能打下基础。方法 以RT－PCR方法确定正常人肺组织和肺腺癌GLC－82细胞ndr2的表达高低。PCR方法扩增ndr2，以BamHI EcoRI双酶切连接入pUC19载体中，测序正确后，插入到蜕皮素诱导的真核表达载体pIND中。连有ndr2基因的载体（pIND-ndr2)用指质体方法转染到培养的肺腺癌细胞GLC－82中。经G418和zeocin双抗生素筛选后，挑取单克隆进行培养，用蜕皮素诱导ndr2表达，用RT－PCR，western印迹和免疫组织化学方法验证获得表达的细胞株。结果 PCR的方法扩增获得大小约1200bp的片段，连接入预先插入HA－tag的pUC19载体的ndr2基因经HindⅢ EcoRI酶切后，构建到真核表达载体pIND中，酶切鉴定后证明连接片段正确。通过双载体转染和双抗生素筛选后，培养的细胞经诱导后检测到实验组ndr2的高表达，而对照组和未诱导的实验组ndr2表达均较低。结论 ndr2基因成功转染培养的肺腺癌GLC－82细胞，建立了ndr2的可诱导表达的细胞系。 |
| 关 键 词： | 肺腺癌 ndr2基因 细胞转染 基因表达 肺肿瘤 GLC－82细胞 |
| 文章编号： | 1000-2790(2002)13-1209-05 |
| 修稿时间： | 2002-03-15 |
Research of inducible expression of ndr2 gene in lung adenocarcinoma GLC-82 cells |
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| LI Shu Jun ,,WANG Hua ,QI Hao Wen ,ZHANG Jian ,HE Peng ,ZHANG Wen Hong ,JI Shao Ping ,LIU Xin Ping ,YAO Li Bo. Research of inducible expression of ndr2 gene in lung adenocarcinoma GLC-82 cells[J]. Negative, 2002, 23(13): 1209-1213 | |
| Authors: | LI Shu Jun WANG Hua QI Hao Wen ZHANG Jian HE Peng ZHANG Wen Hong JI Shao Ping LIU Xin Ping YAO Li Bo |
| Affiliation: | LI Shu Jun 1,2,WANG Hua 3,QI Hao Wen 2,ZHANG Jian 1,HE Peng 1,ZHANG Wen Hong 1,JI Shao Ping 1,LIU Xin Ping 1,YAO Li Bo 1 1Department of Biochemistry and Molecular Biology,Faculty of Preclinical Medicine,2Depar |
| Abstract: | |
| Keywords: | ndr2 gene cell transfection expression |
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