| 用Red系统快速敲除痢疾杆菌asd基因 |
| |
| 引用本文： | 王恒樑,冯尔玲,史兆兴,姚潇,苏国富,黄留玉. 用Red系统快速敲除痢疾杆菌asd基因[J]. 军事医学科学院院刊, 2002, 26(3): 172-175 |
| |
| 作者姓名： | 王恒樑 冯尔玲 史兆兴 姚潇 苏国富 黄留玉 |
| |
| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071 |
| |
| 基金项目： | 国家重大基础研究规划 (973 )(G19990 5 410 3 )，首都二四八重大创新工程 (H0 10 2 10 3 60 119)资助项目 |
| |
| 摘 要： | 目的 :用Red系统快速敲除痢疾杆菌asd基因。方法 :本研究首先合成一对引物 (每一条的 5′端与asd基因同源 ,3′端与氯霉素抗性基因同源 ) ,并用来获得氯霉素抗性基因的PCR产物 ,然后电击转化至大肠杆菌DH5α和痢疾杆菌福氏 2a 2 4 5 7T中 ,在λRed重组系统的帮助下 ,通过氯霉素抗性基因两侧的asd基因序列在体内与asd基因发生同源重组 ,置换了DH5α和 2 4 5 7T基因组中的asd基因 ,最后又利用氯霉素抗性基因两端的FRT位点 ,通过FTP位点专一性重组将氯霉素抗性基因剔除。结果与结论 :获得了asd基因被完全敲除且不带氯霉素抗性基因的大肠杆菌和痢疾杆菌 ,使Red系统在大肠杆菌以外微生物中的应用获得成功。
|
| 关 键 词： | 痢疾 杆菌性 Red重组系统 基因敲除 聚合酶链反应 |
| 文章编号： | 1000-5501(2002)03-0172-04 |
| 修稿时间： | 2002-05-15 |
Quick knockout of Shigella flexneri asd gene with Red system |
| |
| WANG Heng_Liang,FENG Er_Ling,SHI Zhao_Xing,YAO Xiao,SHU Guo_Fu,HUANG Liu_Yu. Quick knockout of Shigella flexneri asd gene with Red system[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2002, 26(3): 172-175 |
| |
| Authors: | WANG Heng_Liang FENG Er_Ling SHI Zhao_Xing YAO Xiao SHU Guo_Fu HUANG Liu_Yu |
| |
| Affiliation: | WANG Heng_Liang,FENG Er_Ling,SHI Zhao_Xing,YAO Xiao,SHU Guo_Fu,HUANG Liu_Yu * |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | dysentery bacillary Red recombinant system gene knock_out polymerase chain reaction |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
